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凱氏定氮法測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果偏高是為什么

閱讀:4733        發(fā)布時(shí)間:2020-7-3

凱氏定氮法只能檢測(cè)蛋白質(zhì)中氮含量,,不能檢測(cè)氨基酸的含量,。其中蛋白質(zhì)含量也只是稱為粗蛋白質(zhì)的含量,只是用氮的含量乘以6.25(系數(shù))得出,,不是真正的蛋白質(zhì)的含量,。

凱氏定氮法測(cè)氮的方法如下:

1、稱取0.5~1g試樣(含氮量5~80mg)準(zhǔn)確至0.0002g,,無損失地放入凱氏燒瓶中,,加入硫酸銅0.9g,無水硫酸鉀(或硫酸鈉)15g,,與試樣混合均勻,,再加硫酸25ml和2粒玻璃珠,在消煮爐士小心加熱,,待樣品焦化,,泡沫消失,再加強(qiáng)火力(360~410℃)直至溶液澄清后,,再加熱消化15min,。

2、氨的蒸餾

(1)常量直接茂餾法 將上述的試樣消煮液冷卻,,加蒸餾水200ml,,搖勻,冷卻,。沿瓶壁小心加入40%氫氧化鈉溶液100ml,,立即與蒸餾裝置相連.蒸餾裝置冷凝管的末端應(yīng)浸入50ml硼酸吸收液lcm。加混合指示劑2滴,,輕搖凱氏燒瓶,,使溶液混勻,加熱蒸餾,,直至餾出液體積約150ml,。先將吸收液取下,,再停止加熱。

(2)半微量水蒸汽蒸餾法 上述試樣的消煮液冷卻,,加蒸餾水20m1轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,,冷卻后用水稀釋至刻度,搖勻,,為試樣分解液,。取2%硼酸溶液20ml,加混合指示劑2滴,,使半微量蕉餾裝置的冷凝管末端浸入此溶液,;蒸餾裝置的蒸汽發(fā)生器的水中應(yīng)加甲基紅指示劑數(shù)滴,硫酸數(shù)滴,,且保持此液為橙紅色,,否則應(yīng)補(bǔ)加少許硫酸。準(zhǔn)確移取試樣分解液10~20ml注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中,,用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口,,塞好入口玻璃塞,再加10ml40%氫氧化鈉溶液,,小心提起玻璃塞使之流入反應(yīng)室,,將玻璃塞塞好,并在入口處加水封密好,,防止漏氣,,蒸餾4min,使冷凝管末端離開吸收液面,,用蒸餾水洗冷凝管末端,,洗液均流入吸收液。

3,、滴定 用硼酸吸收氨后,,立即用0.05mol

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