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凱氏定氮儀可以測蛋白質(zhì)含量嗎?
可以,。凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法,。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收，再以標準堿滴定,，就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,，可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,，故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
凱氏定氮法首先將含氮有機物與濃硫酸共熱,，經(jīng)一系列的分解,、碳化和氧化還原反應等復雜過程，后有機氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機氮硫酸銨,，這一過程稱為有機物的消化,。為了加速和*有機物質(zhì)的分解,，縮短消化時間，在消化時通常加入硫酸鉀,、硫酸銅,、氧化、過氧化氫等試劑,，加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點而加快有機物分解,，除硫酸鉀外，也可以加入硫酸鈉,、氯化等鹽類類提高沸點,，但效果不如硫酸鉀。硫酸銅起催化劑的作用,。凱氏定氮法中可用的催化劑種類很多,，除硫酸銅外，還有氧化,、汞,、硒粉、鉬酸鈉等,，但考慮到效果,、價格及環(huán)境污染等多種因素，應用廣泛的是硫酸銅,。使用時常加入少量過氧化氫,、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機物氧化。消化完成后,，將消化液轉(zhuǎn)入凱氏定氮儀反應室,，加入過量的濃氫氧化鈉，將NH4+轉(zhuǎn)變成NH3,，通過蒸餾把NH3驅(qū)入過量的硼酸溶液接受瓶內(nèi),，硼酸接受氨后，形成四硼酸銨,，然后用標準鹽酸滴定,，直到硼酸溶液恢復原來的氫離子濃度。滴定消耗的標準鹽酸摩爾數(shù)即為NH3的摩爾數(shù),，通過計算即可得出總氮量,。在滴定過程中，滴定終點采用甲基紅-次甲基藍混合指示劑顏色變化來判定,。測定出的含氮量是樣品的總氮量,，其中包括有機氮和無機氮。
