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操作步驟

1,、冰凍制片組織常規(guī)取材。

2,、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分,。

3、在冷凍切片機里預(yù)冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑,。

4,、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。

5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃),，待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘,。

6、將組織托夾入切片夾頭,，進行切片,。

7,、切片完成后可將組織托置于室溫下 3-5 分鐘解凍后變軟,，用水將包埋劑沖洗干凈。

8,、將組織放入包埋盒,，浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進行組織固定。

結(jié)果

1,、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織,，冷凍后包埋劑和組織變白，硬度適宜,，切片平整,。

2、包埋效果不良:包埋劑過多導(dǎo)致溢出組織托外圍,、包埋劑過少不能有效支撐組織或冷凍錘溫度不夠低導(dǎo)致冷凍速度過慢引起組織偏軟,，不能切片。

注意

1,、冷凍切片組織包埋劑到達最佳切片硬度所要求的溫度區(qū)間為-10℃ - -30℃,，溫度過高質(zhì)軟不能切片，溫度過低切片會出現(xiàn)碎裂現(xiàn)象,。

2,、組織脫水前需要將組織表面殘留的冷凍切片組織包埋劑充分洗凈，避免包埋劑進入脫水流程,。

3,、冷凍切片貼片固定后不水洗就進入蘇木素染色流程，切片中殘留包埋劑將會與蘇木素染色液結(jié)合,，出現(xiàn)非特異性蘇木素染色,。