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常用的培養(yǎng)基有哪幾款?
閱讀:576 發(fā)布時(shí)間:2024-3-191,、BME細(xì)胞培養(yǎng)基
基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設(shè)計(jì),,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素,。簡單、便于添加,,適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用,,在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM,、DMEM、IMDM等,。
2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基
又稱Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),,1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)上修改而來,,刪去賴氨酸、生物素,,氨基酸濃度增加,,適合多種細(xì)胞單層生長,有可高壓滅菌品種,,是一種最基本的培養(yǎng)基,,但因其營養(yǎng)成分所限,針對生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí),,并不一定是使用效果或者經(jīng)濟(jì)的培養(yǎng)基,。
3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,,起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的,。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用,。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長需要,,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,特別適用于生長速度快,、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,也適用于附著性較差,,但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗,、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。
4,、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,,用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒,、額外的氨基酸和維生素,、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞,,LPS刺激的B細(xì)胞,,骨髓造血細(xì)胞,T細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長,。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,,因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。
5,、RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,,針對淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),含BSS+21種氨基酸+維生素11種等?,F(xiàn)也用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,如哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞,、正?;驉盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),,其它像K-562,、HL-60、Jurkat,、Daudi,、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用,。