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細胞居中和細胞邊緣化

從經(jīng)濟和高效的角度來說,，需要根據(jù)實驗目的選擇不同規(guī)格的培養(yǎng)板。如在進行藥物對待測細胞半抑制率（IC50）測試時,，通常使用96孔板,，一方面可以設(shè)置濃度梯度；另外還可一次性測多個藥物,，減少實驗誤差,。

 

收集細胞要混勻

消化后的細胞一定要充分混勻，要把聚在一起的細胞團充分地吹打開,，最好是單個的狀態(tài),，但同時又不能損傷細胞，可以用玻璃吸管的移液器操作,。離心也很有講究,，一般用1000 rpm/min即可。離心力太大細胞容易抱團,，然后懸浮離心后的細胞團時，先不要把所有液體都加進,，一般先加2mL液體,，然后用1mL移液器輕輕將細胞吹起，細胞要像云霧一樣散開,，這樣易于形成單細胞,。

 

鋪6孔板，12孔板或24孔板,，先在每個孔里面加1mL的培養(yǎng)基,，晃動使之鋪勻整個孔底，然后加入1 mL的細胞懸液,。從孔的左邊靠近底部慢慢加入,，這樣細胞懸液會平鋪在整個孔底,，細胞分散較均勻，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下,。這里又有一個竅門,，放在顯微鏡的載物臺上面。因為顯微鏡的載物臺是水平校正過的,，比什么桌面,、超凈臺什么的要平多了。在載物臺上放置20-30分鐘,，細胞不差這一會溫度和二氧化碳的,，等細胞貼壁了，輕輕移入到孵箱中,。
鋪96孔板,，我每孔是加100微升細胞懸液，加完半邊板48孔后,，將剩下的未加的細胞懸液再混一下,，再繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子,，左手輕輕扶住板的左邊,，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度,，敲三次即可,，太大力或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆。