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如何配置PBS?
閱讀:1402 發(fā)布時(shí)間:2023-6-30PBS作為生物實(shí)驗(yàn)中試劑,,PBS是磷酸緩沖鹽溶液,一般作為溶劑,,起溶解保護(hù)試劑的作用,。一般的有活性的生物制劑都要用它來(lái)稀釋。它具有鹽平衡,、可調(diào)整適宜pH,、可以緩沖pH等特點(diǎn)。
PBS,、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢,?
蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性,;而生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)。
在實(shí)驗(yàn)室也常見(jiàn)PB,、PBST溶液,。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學(xué)反應(yīng),用PB溶液就行,。在PB的基礎(chǔ)上按照一定比例加NaCl,,就可配置PBS;將磷酸鈉和磷酸鉀,,NaCl,,Tween-20按照一定比例,即可配成PBST溶液,。
PBS配置過(guò)程
第一步,,準(zhǔn)備洗干凈的瓶子和配置PBS所需的純水。
第二步,,根據(jù)所需要的PBS濃度確定各成分需要的量,,不同實(shí)驗(yàn)室要求不一樣,所以成分及用量會(huì)有區(qū)別,。
第三步,,將稱取的藥品加入純水?dāng)嚢柚寥芙狻?/p>
第四步,將溶液pH調(diào)整至7.4左右,。這里不同實(shí)驗(yàn)對(duì)溶液pH要求不一樣,,細(xì)胞部門主要是用于胰酶消化細(xì)胞,胰酶在偏堿性環(huán)境活性會(huì)強(qiáng)一點(diǎn),,所以細(xì)胞部門的pH可以稍微偏高一點(diǎn),,一般實(shí)驗(yàn)使用的話調(diào)整pH 7.2-7.4即可。
第五步,,將配好的溶液定容到所需的體積,,然后高溫高壓滅菌或者0.22um濾膜過(guò)濾除菌。時(shí)間充足的可以高溫高壓滅菌,,比較著急用的可以直接0.22um濾膜過(guò)濾,。
第六步,等滅菌的PBS溫度降下來(lái)或者過(guò)濾了就是無(wú)菌的PBS了,,擰緊瓶蓋,,封上封口膜,就可以放在4度冰箱備用了,。