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PDA培養(yǎng)基的配制,,特點(diǎn)及用途
閱讀:1698 發(fā)布時(shí)間:2023-6-20PDA培養(yǎng)基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱,即Potato Dextrose Agar (Medium),,依次對應(yīng)馬鈴薯,、葡萄糖、瓊脂的英文,。
特點(diǎn)及用途:
一種常用的培養(yǎng)基,,宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌,、蘑菇等真菌
按物理性狀劃分:固體培養(yǎng)基
按培養(yǎng)基成分劃分:半合成培養(yǎng)基
PDA培養(yǎng)基的配制
(1)稱量和熬煮
按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,,加水1000ml,,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml,。
(2)加熱溶解
把濾液放入鍋中,,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),,然后放在石棉網(wǎng)上,,小火加熱,,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,,待瓊脂溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量,。
(3)分裝
按實(shí)訓(xùn)要求,,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染,。
分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,,滅菌后垂直待凝,。
(4)加棉塞
培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),,以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能,。
(5)包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,,再在棉塞外包一層牛皮紙,,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞,,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,,用記號筆注明培養(yǎng)基名稱,、組別、配制日期,。
其他事項(xiàng):
1.培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,,必須放在37℃溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長方可使用,。
2.PDA培養(yǎng)基一般不需要調(diào)pH,。對于要調(diào)節(jié)pH的培養(yǎng)基,,一般用pH試紙測定其pH,。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時(shí),可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進(jìn)行調(diào)節(jié),。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液,,防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分,。
3.培養(yǎng)基在使用時(shí)也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基,用于菌類的震蕩培養(yǎng),。
4.培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素,,加入量為0.2g/L培養(yǎng)基,主要是為了抑制細(xì)菌的生長,,減少干擾性,。