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一、分離方法會影響胰島的產(chǎn)率和存活率：

因此，取材時需要注意

1.胰臟應快速取材,，保持包膜完整,。

2.建議采用UW溶液運輸。

3.對胰臟進行評估,，在消化酶灌注前去除多余的脂肪和殘留的十二指腸和脾臟,。

4.消化過程不宜進行震蕩，以保證胰腺組織被灌注的消化酶液消化,，而不是被胰腺所釋放的胰蛋白酶消化,。

5.要保證胰島的包膜完整，消化不能太充分,。寧可不足,，也不可過頭，否則會影響胰島純化的產(chǎn)率,。

 

二,、分離胰島細胞時的注意事項：

1. biocoll分離液使用時，是采用連續(xù)密度梯度,，需要分別配制密度為1.065g/mL（UW溶液與Biocoll混合）和密度為1.095 g/mL（UW溶液與Biocoll混合）的溶液,，二者再混合。

2. 分離時離心1800rpm,，可考慮離心10分鐘,，之后使COBE細胞分離機保持4℃，防止酶激活導致結構完整性破壞,。

3. 胰島在最輕密度層,，隨著密度增加，也會有部分胰島,，但外分泌組織也會增多,。