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細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法主要包括：電穿孔法,、磷酸鈣沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法,、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等,，理想的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法是具有高轉(zhuǎn)染效率、對(duì)細(xì)胞的毒性作用小等,，本文主要介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的方法-脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的原理和操作步驟,。

脂質(zhì)體(Liposome)轉(zhuǎn)染方法原理：
脂質(zhì)體作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具，已經(jīng)研究的十分廣泛,，中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體,，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。 優(yōu)點(diǎn):與其它方法相比,，有較高的效率和較好的重復(fù)性,，它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下的轉(zhuǎn)染方法之一,。

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染操作步驟
(1)細(xì)胞培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿,，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,，密度過(guò)大,，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量) A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA,。 B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體,。 分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘,。
(3)吸取B液加入至A液中,，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4)轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液,。
(5)轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻,，37℃溫箱置6~24小時(shí),，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),。
(6)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA,，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率,。