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甘油醛-3-磷酸脫氫酶的介紹
閱讀:931 發(fā)布時間:2022-12-13該酶是糖酵解反應中的一個酶,由4個30-40kDa的亞基組成,,分子量146kDa,。該酶基因為管家(house keeping)基因,幾乎在所有組織中都高水平表達,,在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恒定的,,且不受含有的部分識別位點、佛波脂等的誘導物質的影響而保持恒定,,故被廣泛用作抽提total RNA,,poly(A)+ RNA,,Western blot等實驗操作的標準化的內參。常用的內參有,,ACTB(β-actin,、β-肌動蛋白)、GAPDH或18S等,。目的是在于避免RNA定量誤差,、加樣誤差以及各PCR反應體系中擴增效率不均一、各孔間的溫差等所造成的誤差,、這些都是管家基因,,在各個組織中的表達量相對穩(wěn)定,其中18S同整個基因譜有關(負責裝配),,它在總RNA中占的比例最高,。
轉染了GAPDH相關siRNA的HeLa細胞在轉染后48小時后不斷增殖。 紅:被標記的siRNA,;藍:被染色的細胞核,;綠色:GAPDH蛋白。
陰性對照(scrambled siRNA)的導入(左)對GAPDH蛋白的表達沒有影響,,不過若轉入一個以GAPDH(右)為靶標的siRNA,,則會導致GAPDH蛋白表達水平的急劇下降。