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1,、在提取組織RNA時,，每50～100mg組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解,；提取細胞RNA時，先離心沉淀細胞,，每5-10╳106個細胞加1ml Trizol后,，反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。

2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘,；在EP管中,，按照每1mlTRIZOL加0.2ml氯/仿的量加入氯/仿，蓋上EP管蓋子,，在手中用力震蕩15秒,，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3分鐘后，12000g（2℃～8℃）離心15分鐘,。

3,、取上層水相置于新EP管中,按照每1mlTRIZOL加0.5ml異丙醇的量加入異丙醇，在室溫下（15℃～30℃）放置10分鐘,12000g（2℃～8℃）離心10分鐘,。

4,、按照每1mlTRIZOL加1ml 75%乙醇進行洗滌，渦旋混合,，7500g（2℃～8℃）離心5分鐘,，棄上清；讓沉淀的RNA在室溫下自然干燥,；用Rnase-freewater溶解RNA沉淀,。

Ps:在收集到生物材料之后，最好馬上進行RNA制備工作,。若需暫時儲存,，則應(yīng)以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜,。在制備RNA時,，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,，不可以先行解凍,，以避免RNase的作用。