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技術文章

一步解決細胞培養(yǎng)板選擇困擾全程干貨

閱讀:1327          發(fā)布時間:2020-11-30

細胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細胞的一種常用和重要的工具,形狀,、規(guī)格,、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫,?你是否正為如何方便,、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱?你對如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑,?對不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會?

 

細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型),;培養(yǎng)孔的孔數(shù)有 6,、12、24,、48,、96、384,、1536 孔等,;根據(jù)材質的不同有 Terasaki 板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型,、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定,。

 

平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

 

不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用,,但當細胞數(shù)目較少,,如做克隆時,就用 96 孔平底板,;另外,,做 MTT 等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,,一般均用平底板,。這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積,、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致,,還便于 MTT 檢測。

 

至于 U 或 V 型板,,一般在某些特殊要求時才使用,。如在免疫學方面,,當做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸以刺激,。因此,,一般需要 U 型板,因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內,。V 型板的用途更少,,一般用于細胞殺傷實驗時,為了使效靶細胞緊密接觸,,常使用 V 型板,,但這種實驗也可用 U 型板替代(加入細胞后﹐低速離心)。除此之外,,圓底還可以拿來做分析,、化學反應、同位素摻入的實驗或是保存樣品用,。

 

孔數(shù)的選擇

 

流式一般用 6 孔,,MTT 一般用 96 孔,細胞爬片一般用 24 孔等,,要具體根據(jù)你的實驗來定,。

 

 

Terasaki 板和普通細胞培養(yǎng)板的區(qū)別

 

Terasakiplate 主要是用于晶體學研究,產(chǎn)品設計便于對晶體的觀察與結構分析,。有 sitting 和 handing drop 兩種方法,。兩種方法應用產(chǎn)品的外形結構也不同,材料上選擇 crystal class polymer,,特殊的材料有利觀察晶體結構,。

 

細胞培養(yǎng)板主要材料是 treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展,。當然還與浮游細胞的生長材料,,降低結合表面積有關,取決于實驗材料上的應用與對材料的選擇,。

 

細胞培養(yǎng)板與酶標板的區(qū)別

 

用多孔細胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以,,可以用它來做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。

 

區(qū)別:酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,,細胞板主要做細胞培養(yǎng),,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,,一般不能用做細胞培養(yǎng),,它主要做免疫酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。

 

常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

 

不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,,一般在 2-3 mm 范圍,,結合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,,而且在搬動過程中易溢出造成污染,。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

培養(yǎng)器皿

面積(cm2

培養(yǎng)液量(ml)

細胞量

96 孔培養(yǎng)板

0.32

0.1

105

24 孔培養(yǎng)板

2

1.0

5×105

12 孔培養(yǎng)板

4.5

2.0

106

6 孔培養(yǎng)板

9.6

2.5

2.5×106

3.5 cm 培養(yǎng)皿

8

3.0

2×106

6 cm 培養(yǎng)皿

21

5.0

5.2×106

10 cm 培養(yǎng)皿

55

10.0

13.7×106

25 cm2 培養(yǎng)瓶

25

5.0

5×106

75 cm2 培養(yǎng)瓶

75

15~30

2×107

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