化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
胎牛血清運(yùn)用中遇到的常見問題
閱讀：1541 發(fā)布時(shí)間：2019-6-211、 怎樣貯存和凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)質(zhì)量量受損?
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融。但必須留意的是,，融解過程中必須規(guī)矩地?fù)u晃均勻,。長時(shí)間貯存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)或許集合而形成沉積或可見的混濁。因而,，推薦在-20℃以下貯存血清,，并防止反復(fù)凍融。
咱們主張血清應(yīng)保存在-2O℃,。若存放于4℃時(shí),，請勿超越一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,，主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍。
2,、血清中包括絮狀沉積,，它們是什么，怎樣處理?
沉積包括纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性,，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除掉沉積,，離心血清(400g,，1-2分鐘)或許簡略的讓其沉積在瓶子底部,，將血清當(dāng)心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不主張采用過濾的方法除掉沉積,，因?yàn)槌练e會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況悄悄搖擺沉積并加熱至37℃就會再溶解,。所以,，運(yùn)用產(chǎn)品時(shí)要搖擺并加熱血清至37℃,，沉積會自然消失。
3,、實(shí)驗(yàn)室怎樣選擇適合的血清?
國內(nèi)一致以為HYCLONE的血清是好的,，可是依據(jù)我在北美的閱歷，國外一般以為GIBCO比HYCLONE好,，所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,，可是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細(xì)胞,，國產(chǎn)的就夠用了,。此外，因?yàn)閲鴥?nèi)HYCLONE,，GIBCO并沒有生產(chǎn)線,，咱們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜,，所以買到假貨的或許性也很大,。所以，我一般會從直銷員那里買血清,，有的國外生物公司因?yàn)閯倓傔M(jìn)入我國,，度不高，可是其實(shí)在國外現(xiàn)已做得很不錯(cuò)了,，如Wisent等,，他們在國內(nèi)有辦事處，我會從那里拿,，血清的質(zhì)量和HYCLONE平起平坐,，但價(jià)格相對優(yōu)惠很多。
4,、 怎樣防止血清中發(fā)生沉積?
按如下操作可防止沉積的發(fā)生：
(1)凍結(jié)血清時(shí),，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉積的發(fā)生,。
(2) 血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)矩?fù)u晃均勻(當(dāng)心勿形成氣泡),，使溫度與成分均一,。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃凍結(jié)，因溫度改變太大,，簡單形成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉積,。
(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得污濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因而受到破壞,，然后影響血清的質(zhì)量,。
(5) 血清的熱滅活十分簡單形成沉積物的增多，若非必要,，可以無須做此過程,。
(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃,，30分鐘的準(zhǔn)則,，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,，時(shí)間過久或搖晃不均勻,，都會形成沉積物的增多。
5,、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與留意事項(xiàng)?
來歷不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與份額不同：兩者所含的促細(xì)胞成長因子,、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與份額不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能成長,，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,，運(yùn)用濃度不同，一般在5%-10%,，有特殊要求的濃度在20%,。
血清保存和運(yùn)用須留意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不行超越一個(gè)月,。凍結(jié)血清時(shí) ,，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解,，然后至室溫放置使之升溫,，不行將冷凍的血清直接放入37℃水浴或許溫箱中，如放在37℃凍結(jié),，色彩加深,，粘稠度也會添加，血清在凍結(jié)和熱滅活后,，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,，防止反復(fù)凍融。