Cas12a檢測系統用DNA熒光淬滅標記熒光探針上?；菡\生物現貨供應

CRISPR_Cas核酸酶主要包括兩類：一類是RNA引導下可以切割RNA鏈的Cas13a和Cas13b,；另一類是RNA引導下可以切割DNA鏈的Cas12a和Cas14。Cas12a和Cas13都有一個共同特點,，除了切割靶向DNA或RNA序列之外,，還可以切割其他DNA或RNA序列，但是Cas13酶的這種附加切割能力比Cas12a要強,。Cas12a的靶基因是ssDNA和dsDNA,，并且Cas12a引導鏈需要識別PAM序列（Cas12a的PAM序列為TTTV）。

Cas12a酶的附加DNA酶切功能,，可以切割特定單鏈DNA探針（熒光和淬滅標記）,，使用5'端帶有熒光物質（如：FAM等)，3'端帶有淬滅物質（如:BHQ1等）的雙標記熒光探針進行熒光檢測的方法,。當探針完整時,，5'端的熒光物質受到3'端的淬滅物質的制約，不能發(fā)出熒光,。而當雙標記熒光探針被分解后,，5'端的熒光物質便會游離出來，發(fā)出熒光,，實現核酸檢測,。RPA擴增的雙鏈DNA，在crRNA的引導下Cas12a可以切割雙鏈模板DNA和熒光標記探針,，探針被水解后釋放出熒光信號,，通過檢測熒光信號便可知道是否有DNA模板。

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