上海惠誠生物提供的CHO 瞬轉(zhuǎn)表達基礎(chǔ)培養(yǎng)基（Basal Medium）與補料培養(yǎng)基（Feed Medium）是完(空)全化學(xué)成分限定（Chemically Defined）,，均不含血清,、水解物及任何動物來源的成分，適合于不同亞型中國倉鼠卵巢細胞（CHO-K1 和 CHO-S 細胞）的高密度懸浮培養(yǎng),，可實現(xiàn)重組蛋白和抗體的高水平表達：培養(yǎng) 7 天表達量在 500mg/L 左右,，14 天表達量 1000mg/L 左右，部分可達 2g/L 以上,。

上?；菡\生物提供 CHO 細胞瞬轉(zhuǎn)表達培養(yǎng)基已完成美國 DMF 登記（DMF039790），更有力的支持客戶需求,。

產(chǎn)品描述

Trans PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種分子量為40 kd的陽離子聚合物,，它能與核酸形成復(fù)合物，并使該復(fù)合物進入哺乳動物細胞,?？蓮V泛適用于常見細胞系，如CHO-K1,、CHO-S,、 HEK293、HEK293T,、 Hep G2,、Hela、COS-1,、COS-7,、NIH/3T3和SF9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,， 它仍然能高效的將核酸導(dǎo)入細胞,。Trans PEI培養(yǎng)基可用于蛋白/抗體瞬時表達、腺相關(guān)病毒,、慢病毒,、疫苗、診斷試劑等領(lǐng)域,，采用高密度強化工藝培養(yǎng)及灌流培養(yǎng),，可獲得更高的表達量或滴度。

Trans PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點：

1.優(yōu)(空)越的轉(zhuǎn)染效率

2.重組蛋白的高表達水平

3.更強的穩(wěn)定性（-20℃保存2年,，2-8℃保存6個月）

4.低細胞毒性,，易于操作

5.可提供GMP級別

6.10mL/支 0.5 mg/mL

推薦使用說明

產(chǎn)品運輸及存儲

運輸：常溫或冷鏈運輸,；

存儲：2~8℃，干燥,、避光保存；

有效期：基礎(chǔ)培養(yǎng)基干粉：2 年,；

基礎(chǔ)培養(yǎng)基液體：1 年,；

補料培養(yǎng)基干粉：2 年；

補料培養(yǎng)基液體：1 年（開封后建議在 3 個月內(nèi)使用完）,。

應(yīng)用范圍

上?；菡\生物提供的培養(yǎng)基可用于 CHO 細胞凍存、復(fù)蘇,、傳代,、高密度強化工藝培養(yǎng)及灌流培養(yǎng)，可實現(xiàn)

細胞快速生長,，維持細胞高活率及蛋白該表達,。

使用指南

細胞凍存

1．準(zhǔn)備處于對數(shù)生長期狀態(tài)較好的細胞，且細胞活率在 90%以上,；

2．檢測活細胞密度,，計算所需的凍存培養(yǎng)基體積，計算最終細胞密度 1~1.5×10 7 cells/mL,；

3．準(zhǔn)備好所需的凍存培養(yǎng)基：90%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10% DMSO,，2~8℃冷藏保存,；

4．設(shè)置離心力 200×g，離心 5 min,，用凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞至凍存體積,；

5．將懸浮細胞等分保存至適宜規(guī)格的細胞凍存管中；

6．將細胞凍存管置于程序降溫盒中,，按照降溫標(biāo)準(zhǔn)進行降溫,；

7． 將細胞轉(zhuǎn)移到液氮罐中保存。

細胞復(fù)蘇

1．提前打開水浴鍋,，并設(shè)置溫度至 36.5℃~37.0℃,；

2．將細胞從液氮罐中移出后，快速在水浴鍋中融化冷凍的細胞（＜3 min）,；

3．將冷凍管中的細胞液全部轉(zhuǎn)移到 125 mL 含有 30 mL 預(yù)溫過的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的搖瓶中,；

4．置于 36.5~37.0℃，5~8% CO 2 ,，轉(zhuǎn)速 120 rpm（軌道振幅 50 mm）的搖床中培養(yǎng),；

5． 細胞至少傳代 2 次，待細胞完(空)全復(fù)蘇且活率在 90%以上,，可按計劃進行后續(xù)操作,。

細胞傳代

1．將基礎(chǔ)培養(yǎng)基放入 36.5~37.0℃條件下預(yù)熱 20 min；

2．檢測活細胞密度,，按接種密度為 0.3×10 6 cells/mL 的最終傳代體積,，計算所需種子液量；

3．無菌轉(zhuǎn)移所需量的種子液,，添加至含所需體積的已預(yù)熱的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的搖瓶中,；

4．將搖瓶放入溫度 36.5~37.0℃，120 rpm（振幅 50 mm）（搖瓶底面積增大,，需減小搖床轉(zhuǎn)速）,，

5%~8% CO 2 的細胞培養(yǎng)搖床中進行培養(yǎng)；

5．每 3 天用新鮮的培養(yǎng)基按上述步驟進行傳代培養(yǎng),。

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