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瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒使用過程中可能出現(xiàn)一些問題,比如:如何選擇預(yù)制膠濃度,,選擇什么體系,,Marker條帶電泳清晰但樣品電泳很差,回收低,,掛孔和圖像不好等原因,,惠誠生物針對推出的該款預(yù)制膠進(jìn)行解答。
1,、如何選擇預(yù)制膠濃度,?
不同分子量對應(yīng)的預(yù)制膠濃度,實驗情況很復(fù)雜,,下表僅供參考:
2,、能不能使用其他體系?
目前這款預(yù)制膠使用體系為TAE,,不能在其他體系(如TBE/TPE)的電泳液中電泳,;
3、Marker條帶電泳清晰,,樣品電泳很差,?
一般情況是樣本的問題,因為膠只是一個平臺,,不改變核酸的結(jié)構(gòu)和形態(tài),,具體解決方案如下:
A、調(diào)整電壓(一般降低),;B,、減少上樣量或者稀釋;C,、用新的制備樣品,;D、調(diào)整PCR 的條件(如退火溫度)等等,。
4,、為什么回收低?
若回收低,,需要調(diào)高熔膠溫度和延長熔膠時間,,具體原因如下:
A、膠是0.7cm 厚的標(biāo)準(zhǔn)膠,,比用戶自配的膠在切膠的位置厚很多,,因此在切膠的過程中切的膠要比自配的膠多;
B,、膠孔比用戶原來自己的孔寬一點點,,用戶在切膠的過程中也會比自配的膠切的多。
這樣的話,,用戶使用他們原來的習(xí)慣,,在相同的時間膠沒有*熔掉,回收量就會少很多,。
5,、出現(xiàn)掛孔的原因?
用戶在電泳液外面點樣,,樣品因為沒有電泳液保護(hù),,會很快擴(kuò)散到膠里,有可能形成掛孔,。
6,、圖形不好怎么辦?
預(yù)制膠因為在低溫時間長,,電泳時較好比客戶經(jīng)常使用的電壓低一些,,調(diào)低20-40伏特左右,,會得到比較好的圖形。
7,、電泳是一個系統(tǒng),,任何原料都可能引起變化,任何改變也需要調(diào)整,。根據(jù)實際需求,,選擇*優(yōu)方案。
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