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擬南芥作為高等植物的模式生物被*的植物生物學實驗室廣泛研究,。芥培養(yǎng)可用于基因表達,、器官發(fā)育,、基因突變等研究,。然而,,怎么培養(yǎng)好這種小植物可能不是那么容易,。
1,、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進行消毒處理,,再用*進行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘),。用無菌水沖洗5遍,然后將種子點到MS培養(yǎng)基上,,pH5.9,,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2,、把種子放到冷光源培養(yǎng)箱中,,設置4℃黑暗條件下進行春化48h-72h左右,在長日照或短日照條件下催芽。利用PLC控制器,,編輯簡單的晝夜模式,,設定光照時間16小時(黑暗8小時)或者光照14小時(黑暗10小時);選配Q23+連續(xù)光強調節(jié)裝置,,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室內溫度為光照條件下20-22℃,,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統(tǒng),,設定室內相對濕度70%,。
3、出苗大約7~10天,,然后移入土中培養(yǎng),,采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在*次澆水前,,可使土壤*干燥,,以后每隔7~10天澆一次水。
4,、土壤可用營養(yǎng)土,、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥,、蛭石以及草炭等進行混合,。在生長過程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥,。
5,、當植株長到一定高度時,可剪斷莖桿,,以產(chǎn)生更多的花序,,可用于轉化研究或者獲得更多的種子
擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng)
為了加快擬南芥生長速度,,在移入土壤培養(yǎng)后,,可設定長日照,利用PLC控制器,,編輯程序設定24h光照,,光強100-250umol/m2.s,溫度持續(xù)22-23℃,。
擬南芥根系處理培養(yǎng),,可減少光照時間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,,溫度為光照條件下22-23℃,,黑暗條件下18-20℃,其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。
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