熒光濾光片的工作原理:分子在吸收帶吸收激發(fā)光譜,,然后在發(fā)射帶發(fā)射長(zhǎng)波的輻射光譜,即形成了熒光光譜,。
在分析領(lǐng)域,熒光可用于對(duì)生物和化學(xué)活性進(jìn)行定性判別,、定量分析和實(shí)時(shí)觀察,。
由于靈敏度高、特異性好,、簡(jiǎn)便等特點(diǎn),,熒光濾光片廣泛應(yīng)用于生物和分析等領(lǐng)域。
熒光濾波片選取的原則是在成像端盡可能讓熒光/發(fā)射光透過,,同時(shí)*阻擋激發(fā)光,,獲得高信噪比。
尤其是對(duì)于多光子激發(fā)和全內(nèi)反射顯微鏡的應(yīng)用,,微弱的噪聲也會(huì)對(duì)成像效果造成很大的干擾,,因此對(duì)信噪比的要求更高。
通常我們看濾光片的參數(shù)一般會(huì)看透射率光譜,,但往往熒光相對(duì)于激發(fā)光的強(qiáng)度很弱,,
選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值。OD值更能直觀地反映濾光片對(duì)光的阻擋特性,。
在選擇激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片時(shí),,兩者的阻擋深度光譜交點(diǎn)(OD交點(diǎn))是重要的判斷標(biāo)準(zhǔn),
一般要求寬場(chǎng)光源激發(fā)是交點(diǎn)OD值大于5,,激光激發(fā)時(shí)大于OD6,,以實(shí)現(xiàn)較好的熒光信噪比。
通帶的高透過率提高成像亮度,,截止帶的深截止度確保不必要的光都被阻擋在通帶外,,保證了成像質(zhì)量的高信噪比和高對(duì)比度,在任何應(yīng)用中產(chǎn)生最大的亮度和對(duì)比度,。