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本生(天津)健康科技有限公司
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BS-3577-A-大鼠5-α還原酶(5AR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
  • BS-3577-A-大鼠5-α還原酶(5AR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

貨物所在地:天津天津市

更新時(shí)間:2025-01-13 08:47:09

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大鼠5-α還原酶(5AR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,熒光定量PCR耗材,,移液器吸嘴,,微量離心管,,進(jìn)口凍存管,,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,,培養(yǎng)瓶,,吸頭,儀器及手套,,色譜耗材,,針頭過(guò)濾器。

大鼠5-α還原酶(5AR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書

本試劑盒僅供研究使用,。

檢測(cè)范圍:

96T

0.5pg/ml-35pg/ml

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定雞血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中5-α還原酶(5AR)水平,。用純化的抗原包被微孔板,,制成固相抗抗原,往包被單抗的微孔中依次加入5-α還原酶(5AR),,再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合,,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的5-α還原酶(5AR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠5-α還原酶(5AR)濃度,。

大鼠5-α還原酶(5AR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒試劑盒組成

130 倍濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7終止液6ml×1 瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶

8標(biāo)準(zhǔn)品(64pg/ml)

0.5ml×1 瓶3

酶標(biāo)包被板12 孔×8 條

9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶

4樣品稀釋液

6ml×1 瓶10

說(shuō)明書1 份

5顯色劑 A 液

6ml×1 瓶11封板膜2 張

6顯色劑 B 液

6ml×1/瓶12

密封袋1 個(gè)

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

32pg/ml5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

16pg/ml4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

8pg/ml3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4pg/ml2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2pg/ml1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔,、

待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,,然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡

量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此重復(fù) 5 次,,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,,空白孔除外,。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5,。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。

11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒操作程序總結(jié):

操作程序總結(jié):.png

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好

控制在 5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本 OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,,計(jì)

算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃,。

2.有效期:6 個(gè)月



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