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微生物角鯊烯環(huán)氧化酶(SE)ELISA檢測(cè)試劑盒 天津本生生物供應(yīng)ELISA試劑盒種屬全,,實(shí)驗(yàn)室耗材種類全,,PCR耗材,離心管,,進(jìn)口吸頭等等,。
應(yīng)用范圍:血清、血漿,、組織勻漿,、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)
一、服務(wù)
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,,比如在檢測(cè)范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,,有效控制檢測(cè)試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
如果您在使用elisa試劑盒產(chǎn)品時(shí)有任何的疑問(wèn),,或者對(duì)我們有任何意見建議,,您都可以通過(guò)來(lái)電或QQ咨詢,我們的銷售/技術(shù)工程師7×24h為您服務(wù),。
二,、ELISA檢測(cè)概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原,、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù),。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,,每加入一種試劑孵育后,,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。
實(shí)際應(yīng)用中,,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法,、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù),。
三,、技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) | 間接法(檢測(cè)未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml,。在反應(yīng)孔中加0.1ml,,4℃ 過(guò)夜,。次日,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,。 2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔),。 3,、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml,。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),,洗滌。 4,、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。 5,、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6,、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng) | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml,, 每孔加0.1ml,,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次,。 2,、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白,、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照) 3,、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,后一遍用DDW洗滌。 4,、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。 5,、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6,、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng)性。 |
四,、客戶須知
1,、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿,、血清,、血漿、尿液,、胸水,、腹水、腦脊液等);
2,、樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè),,2-8℃保存一天;需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,,置-20℃或-70℃保存;
3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬,、樣本數(shù)量,、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求,。
五、報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1,、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線;
2,、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟;
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑耗材,,實(shí)驗(yàn)方法,,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說(shuō)明);
微生物角鯊烯環(huán)氧化酶(SE)ELISA檢測(cè)試劑盒
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