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當前位置:> 供求商機> BS-0790-人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器,分光光度計。
本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍: 96T
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)含量,。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)水平。用純化的胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI),再與HRP 標記的胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)濃度,。
試劑盒組成:
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個
標本要求
1. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性,。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
60 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30 ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15 ng/L3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
7.5 ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3.75 ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,,
然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡
量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同 3,。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。
人胎盤核糖核酸抑止劑試劑盒,人(HPRI)ELISA試劑盒
操作程序總結(jié):
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。6.底物請避光保存,。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9. 本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準,。
保存條件及有效期
1. 試劑盒保存:;2-8℃,。
2. 有效期:6 個月
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