上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說明書本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,血清,，熒光定量PCR耗材,，移液器吸嘴，微量離心管,，進口凍存管,，細胞培養(yǎng)皿，培養(yǎng)板,，培養(yǎng)瓶,，吸頭，儀器及手套,，色譜耗材,，針頭過濾器。

英文名稱：Mouse Leptin,LEP ELISA試劑盒

本試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中指標的濃度呈比例關(guān)系。

貨號：BS-2619

規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品名：小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒

檢測種屬：人,、大小鼠,、豚鼠、兔子、豬,、犬,、牛羊、雞鴨,、猴ELISA試劑盒等種屬,。

保存條件及有效期：

1、試劑盒保存：2-8℃,。

2,、有效期：6個月

標記物：血清、血漿,、組織勻漿等

【測試種屬】犬,、大小鼠、人,、豚鼠,、兔子、牛羊,、豬,、雞鴨elisa試劑盒等種屬
【儲存方式】：2-8℃
【檢測目的】用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本。
【用途】科研實驗,，不用于臨床診斷。

小鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISAkit   試劑盒代測  瘦素（LEP）

上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說明書

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒操作步驟：

小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個1 個
酶標包被板1×481×962-8℃保存
標準品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標準品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

作步驟：

1. 使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。

2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。

6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作4次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育5分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9. 在450nm波長處測定各孔的OD值,。

結(jié) 果 判 斷 與分析：

1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),，相應(yīng)的指標標準品濃度為橫坐標(X),，做得相應(yīng)的曲線，樣品的含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度,。

產(chǎn)品用途：可用于科研實驗,不用于臨床治療！