人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA檢測(cè)試劑盒本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,血清，熒光定量PCR耗材,，移液器吸嘴，微量離心管,，進(jìn)口凍存管,，細(xì)胞培養(yǎng)皿，培養(yǎng)板,，培養(yǎng)瓶,，吸頭，儀器及手套,，色譜耗材,，針頭過(guò)濾器。

貨號(hào)：BS-1477

規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品名：人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒

檢測(cè)種屬：人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛羊,、雞鴨,、猴ELISA試劑盒等種屬,。

保存條件及有效期：

1、試劑盒保存：2-8℃,。

2,、有效期：6個(gè)月

標(biāo)記物：血清、血漿,、組織勻漿等

【測(cè)試種屬】犬,、大小鼠、人,、豚鼠,、兔子、牛羊,、豬,、雞鴨elisa試劑盒等種屬
【儲(chǔ)存方式】：2-8℃
【檢測(cè)目的】用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
【用途】科研實(shí)驗(yàn),，不用于臨床診斷,。

人ELISA試劑盒 人ELISAkit   試劑盒代測(cè)  蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA檢測(cè)試劑盒

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行,。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用,。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒操作步驟：

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說(shuō)明書(shū)1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒ELISA測(cè)定的影響做如下討論,。

血清是常用的ELISA標(biāo)本，血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：

1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有：類(lèi)風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體,、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體,、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。

外源性物質(zhì)

2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集,、貯存等不當(dāng)所致,。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染,、標(biāo)本貯存過(guò)久,、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。

(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,，在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,，干擾測(cè)定結(jié)果,。為克服上述干擾作用，標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血,。

(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果,。

(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，血清中IgG可聚合成多聚體,、AFP可形成二聚體,，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),，有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,，ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,，不可強(qiáng)烈振蕩,。

(4)標(biāo)本凝集不全 在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,，18~24h*凝固,。臨床檢驗(yàn)工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,，此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,，易造成假陽(yáng)性結(jié)果;這類(lèi)情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,，解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,，EDTA),、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用。 綜上所述,，對(duì)臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,，在考慮試劑因素和操作因素之外，更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,，并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,，從而為臨床提供正確可靠的檢測(cè)結(jié)果。

產(chǎn)品用途：可用于科研實(shí)驗(yàn),不用于臨床治療,！