兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　以下是兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書，綜合相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)和操作規(guī)范整理：

　　BS-4221 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 天津本生

　　一、試劑盒組成

　　預(yù)包被板?：96孔或48孔(抗兔FⅡ抗體包被)

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：6-7管凍干粉(濃度梯度：0.5-16 μmol/L)

　　檢測抗體?：HRP標(biāo)記的抗兔FⅡ多克隆抗體

　　樣本稀釋液?、20×洗滌緩沖液

　　顯色底物?(TMB A/B)、終止液(2M硫酸)

　　封板膜?、說明書等耗材

　　二,、樣本處理要求

　　血清/血漿?：

　　全血采集后室溫靜置1-2小時，4℃離心(3000 rpm,，20分鐘)取上清

　　避免使用溶血或高脂血樣本,，短期保存于-20℃，長期需-80℃凍存

　　組織勻漿?：

　　按1:9(重量:體積)加入PBS勻漿,，離心后取上清檢測

　　三,、實(shí)驗(yàn)步驟(雙抗體夾心法)

　　標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶?：每管加200 μL稀釋液溶解，梯度稀釋為1/2~1/64濃度系列

　　加樣孵育?：

　　標(biāo)準(zhǔn)孔：直接加50 μL標(biāo)準(zhǔn)品

　　樣本孔：先加10 μL樣本,，再加40 μL稀釋液(5倍稀釋)

　　37℃孵育60分鐘,，洗板5次(手工沖洗或洗板機(jī))

　　顯色與檢測?：

　　每孔加TMB底物50 μL，避光顯色15分鐘

　　加終止液后15分鐘內(nèi)測OD450值

　　四,、注意事項(xiàng)

　　試劑保存?：未開封試劑盒2-8℃保存,，復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品需分裝-20℃凍存

　　質(zhì)量控制?：

　　板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<15%

　　建議標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.990

　　干擾規(guī)避?：避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性)

　　五,、結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，通過四參數(shù)擬合方程計(jì)算樣本濃度,。若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,，需適當(dāng)稀釋后重測

　　如需具體產(chǎn)品的完整說明書或代測服務(wù)，可聯(lián)系供應(yīng)商獲取(部分廠商提供免費(fèi)代測和技術(shù)支持),。

　　注：以上資料僅供參考,，具體請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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