以下是關(guān)于人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理：

　　BS-0223 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA試劑盒

　　一,、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法(ABC-ELISA法)檢測樣本中ICAD濃度,。通過標(biāo)準(zhǔn)品與樣本OD值的比例關(guān)系計算濃度,。

　　二、試劑盒組成

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：400ng/ml或2700ng/L(需用稀釋液復(fù)溶)

　　酶標(biāo)包被板?：96孔或48孔配置

　　顯色劑?：底物A/B液

　　洗滌液?：20×濃縮液需1:20稀釋

　　終止液?：用于終止反應(yīng)

　　三,、操作步驟

　　樣本準(zhǔn)備?

　　血清/血漿：離心后取上清,，避免反復(fù)凍融。

　　組織勻漿：需充分混勻,。

　　標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶?

　　凍干標(biāo)準(zhǔn)品加0.5ml稀釋液,，靜置10分鐘溶解。

　　加樣與溫育?

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔加50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,，樣本孔加10μL樣本+40μL稀釋液,。

　　每孔加入HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育60分鐘,。

　　洗滌?

　　用洗滌液洗板5次,，拍干,。

　　顯色與終止?

　　加底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分鐘,。

　　加終止液50μL,，15分鐘內(nèi)測450nm OD值。

　　四,、注意事項

　　保存條件?：試劑盒2-8℃保存,，使用前室溫平衡20分鐘。

　　質(zhì)量控制?：建議標(biāo)準(zhǔn)品和樣本做雙份檢測,。

　　干擾因素?：避免細(xì)菌污染或反復(fù)凍融,。

　　五、結(jié)果計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,，通過回歸方程計算樣本濃度。

　　如需具體試劑盒的完整說明書,，可參考廠商提供的詳細(xì)文檔,，以上資料僅供參考。

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