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小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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  以下是關(guān)于小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒的實驗使用說明:

  BS-2216   小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒

  一,、實驗原理

  采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。預(yù)先包被sMHC-2捕獲抗體的微孔中依次加入標本,、標準品和HRP標記檢測抗體,,經(jīng)溫育洗滌后,通過TMB顯色反應(yīng)測定吸光度(OD值),,顏色深淺與sMHC-2濃度呈正相關(guān)?,。

  二,、試劑盒組成

  微孔酶標板?:預(yù)包被抗體(96孔或48孔配置)

  標準品?:濃度梯度溶液(通常0.3mL×6管)

  檢測抗體-HRP?:辣根過氧化物酶標記物(10mL/5mL)

  洗滌緩沖液?:20×濃縮液需稀釋使用?

  顯色液?:底物A/B各3-6mL?

  終止液?:酸性溶液(6mL/3mL)?

  三、樣本處理

  血清?:血液離心1000-3000×g 10分鐘,,避免溶血?;

  血漿?:EDTA/肝素抗凝,離心后取上清?;

  組織勻漿?:按1:9比例加PBS勻漿,,3000×g離心10分鐘?;

  保存?:分裝凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融?,。

  四,、操作步驟

  平衡?:取出板條室溫平衡20分鐘,,剩余板條密封4℃保存?;

  加樣?:

  空白孔:不加樣

  標準品孔:50μL不同濃度標準品

  樣本孔:50μL待測樣本?;

  孵育?:加入HRP檢測抗體100μL,,37℃孵育60分鐘?;

  洗滌?:用洗滌液洗板5次,,拍干?;

  顯色?:每孔加底物A/B各50μL,,37℃避光反應(yīng)15分鐘?;

  終止?:加終止液50μL,,15分鐘內(nèi)測450nm OD值?,。

  五,、注意事項

  有效期?:未開封試劑盒通常6個月(2-8℃保存)?;

  線性范圍?:需按說明書標曲濃度操作,超出范圍可能導致誤差?;

  應(yīng)用限制?:僅限科研使用,,不可用于臨床診斷?,。

  如需具體品牌試劑盒的完整說明書,,可參考廠商提供的詳細文檔(如本生BS-2216或天正信達TZXD-2216?),。

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