本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,，追求企業(yè)競爭力的不斷提升,。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己,，寬仁以待,，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,，較大限度的滿足客戶的需求,。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo),，本生,，您信任的合作伙伴!本生試劑盒

　　大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書如下：

　　1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

　　本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)的含量?,。

　　2. 實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)水平,。用純化的大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記的檢測抗體,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色,，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺與樣品中的巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?,。

　　3. 試劑盒組成

　　封板膜：2片

　　說明書：1份

　　密封袋：1個

　　標(biāo)準(zhǔn)品：2700ng/L,，0.5ml×1瓶

　　酶標(biāo)包被板：1×48或1×96

　　樣品稀釋液：3ml×1瓶或6ml×1瓶

　　顯色劑A液：3ml×1瓶或6ml×1瓶

　　顯色劑B液：3ml×1瓶或6ml×1瓶

　　終止液：3ml×1瓶或6ml×1瓶

　　濃縮洗滌液：(20ml×20倍)×1瓶或(20ml×30倍)×1瓶?。

　　4. 樣本處理及要求

　　血清?：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),，收集上清?。

　　血漿?：使用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后離心,，收集上清?。

　　尿液?：無菌管收集,，離心后取上清?,。

　　細(xì)胞培養(yǎng)上清?：檢測分泌性成分時，直接收集上清;檢測細(xì)胞內(nèi)成分時,，需反復(fù)凍融細(xì)胞懸液后離心?,。

　　組織標(biāo)本?：切割后稱重，加入PBS勻漿,，離心后取上清?,。

　　5. 實(shí)驗(yàn)步驟

　　將標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)本依次加入包被微孔板中,，溫育并洗滌?,。

　　加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，溫育并洗滌?,。

　　加入底物TMB顯色,，反應(yīng)終止后測定吸光度(OD值)?。

　　根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?,。

　　6. 注意事項(xiàng)

　　試劑盒需在-20℃保存,，開封后酶標(biāo)板需密封保存?。

　　標(biāo)本采集后應(yīng)盡快檢測,，避免反復(fù)凍融?,。

　　實(shí)驗(yàn)操作需在相同環(huán)境條件下進(jìn)行,，以減少誤差?。

　　7. 結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的OD值計(jì)算濃度，再乘以稀釋倍數(shù)?,。

　　以上為實(shí)驗(yàn)使用說明書的詳細(xì)內(nèi)容,，供參考?。