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人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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  人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)主要包括實(shí)驗(yàn)原理,、試劑盒組成、操作步驟及注意事項(xiàng)等內(nèi)容?,。以下是對(duì)這些內(nèi)容的詳細(xì)歸納:

  實(shí)驗(yàn)原理

  人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定樣品中人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)的水平,。具體原理為:用純化的人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,。往包被抗原的微孔中依次加入待測(cè)樣品中的抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG),,再與HRP(辣根過(guò)氧化物酶)標(biāo)記的抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,。經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色,,TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺與樣品中的抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)含量呈正相關(guān),。通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)的濃度,。

  試劑盒組成

  試劑盒通常包含微孔板、樣品緩沖液,、濃縮清洗緩沖液,、結(jié)合液,、TMB底物液、終止液,、標(biāo)準(zhǔn)品,、陽(yáng)性對(duì)照以及說(shuō)明書(shū)等組件。具體組成可能因不同品牌和批次而略有差異,。

  操作步驟

  ?稀釋與加樣?:將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。

  ?封板與溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時(shí)間(如30分鐘),。

  ?洗滌?:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,然后加滿(mǎn)洗滌液,靜置后棄去,,如此重復(fù)多次,,拍干。

  ?加酶標(biāo)試劑?:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外),。

  ?再次溫育與洗滌?:進(jìn)行溫育后再次洗滌,。

  ?顯色?:加入顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)。

  ?終止?:加終止液終止反應(yīng),。

  ?測(cè)定?:以空白孔調(diào)零,,在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔的吸光度(OD值)?。

  注意事項(xiàng)

  標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),,避免細(xì)菌污染導(dǎo)致假陽(yáng)性反應(yīng),。

  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出后應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

  標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶時(shí)需按照說(shuō)明書(shū)操作,,確保濃度準(zhǔn)確,。

  洗滌步驟需,以避免非特異性結(jié)合影響結(jié)果,。

  顯色和測(cè)定應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成,,以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性?6。

  以上內(nèi)容僅供參考,,具體實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)應(yīng)以實(shí)際購(gòu)買(mǎi)的試劑盒說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn),。

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