人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升,。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法,，嚴(yán)于律己，寬仁以待,，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求,。與客戶的共贏,，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生,，您信任的合作伙伴,！本生試劑盒

　　人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒使用說明書通常包括試劑盒的用途、實(shí)驗(yàn)原理,、試劑盒組成,、樣本處理及要求、操作步驟,、注意事項(xiàng)以及試劑盒性能等內(nèi)容,。以下是一份基于多個(gè)來源整合的IGF-1 ELISA試劑盒使用說明書概要：

　　一、試劑盒用途

　　本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)的含量。

　　二,、實(shí)驗(yàn)原理

　　試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),，計(jì)算樣品濃度。

　　三,、試劑盒組成

　　試劑盒通常包含以下組件(具體數(shù)量可能因不同廠家或批次而異)：

　　酶標(biāo)包被板

　　標(biāo)準(zhǔn)品

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

　　酶標(biāo)試劑

　　樣品稀釋液

　　顯色劑A液和B液

　　終止液

　　濃縮洗滌液

　　封板膜

　　密封袋

　　說明書

　　四、樣本處理及要求

　　?血清?：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,，然后1000×g離心20分鐘,，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

　　?血漿?：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

　　?組織勻漿?：用預(yù)冷的PBS(0.01M,，pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比)加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5-10分鐘,，取上清檢測(cè),。

　　?細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本?：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè),，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

　　五,、操作步驟

　　?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣?：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,，加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。

　　?加樣?：分別設(shè)空白孔,、待測(cè)樣品孔,，加入待測(cè)樣品。

　　?溫育?：用封板膜封板后置37℃溫育一定時(shí)間,。

　　?洗滌?：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置后棄去,，重復(fù)多次，拍干,。

　　?加酶?：每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外),。

　　?溫育?：同前。

　　?洗滌?：同前,。

　　?顯色?：每孔加入顯色劑A和B,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色一定時(shí)間,。

　　?終止?：每孔加終止液,，終止反應(yīng)。

　　?測(cè)定?：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。

　　六、注意事項(xiàng)

　　試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用,。

　　濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

　　各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差,。

　　請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，最好做復(fù)孔。

　　封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

　　底物請(qǐng)避光保存。

　　嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。

　　所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

　　七,、試劑盒性能

　　?檢測(cè)范圍?：根據(jù)不同廠家和批次，檢測(cè)范圍可能有所不同,，如5ng/mL~160ng/mL,。

　　?靈敏度?：低檢測(cè)濃度小于一定值，如1.0ng/mL。

　　?特異性?：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

　　?重復(fù)性?：板內(nèi)變異系數(shù)和板間變異系數(shù)均小于一定值,，如板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%,。

　　請(qǐng)注意,，以上內(nèi)容僅為一般性說明，具體使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵循所購(gòu)試劑盒附帶的使用說明書進(jìn)行操作,。