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植物提取試劑盒使用方法
以下是常見植物提取試劑盒的使用方法及注意事項(xiàng),涵蓋DNA,、RNA及蛋白類樣本的提取流程:
一,、DNA提取(離心柱法)
樣本預(yù)處理?
液氮研磨新鮮組織(100-200mg)或干燥組織(50-100mg)至細(xì)粉狀
多糖多酚樣本需額外加入沉淀溶液去除雜質(zhì)
裂解與純化?
加入裂解緩沖液(如Buffer HB)和Proteinase K,50℃裂解30分鐘
離心后取上清,,加入沉淀緩沖液(Buffer PB)冰浴10分鐘
柱純化?
轉(zhuǎn)移至吸附柱,,依次用去蛋白液和漂洗液洗滌
低鹽緩沖液(Buffer EB)洗脫DNA
二、RNA提取(硅膠柱法)
裂解階段?
液氮研磨后加入含巰基乙醇的提取液,,65℃水浴裂解
酸酚(pH4.5)抽提去除蛋白
沉淀與純化?
加入LiCl溶液4℃沉淀過(guò)夜
硅膠柱吸附RNA,,乙醇洗滌后DEPC水洗脫
三、植物ELISA試劑盒操作
樣本制備?
勻漿后離心取上清,,避免多糖干擾
檢測(cè)流程?
標(biāo)準(zhǔn)品與樣本同步孵育,,洗滌后加入酶標(biāo)二抗
顯色后酶標(biāo)儀讀取OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量
四,、通用注意事項(xiàng)
防污染?:RNA操作需全程使用RNase-free耗材
溫度控制?:裂解和孵育需嚴(yán)格控溫(如65℃水浴)
試劑添加?:漂洗液等需按比例加入無(wú)水乙醇
規(guī)格推薦:
植物提取試劑盒 填料
DNA提取試劑盒(MAXI) 50rxn600μl
DNA提取試劑盒(STD) 100rxn300μl
DNA提取試劑盒(MINI) 100rxn100μl
DNA快檢提取試劑盒 500rxn50μl
注:不同品牌試劑盒步驟可能存在差異,,需以說(shuō)明書為準(zhǔn)。以上資料僅供參考,,具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或供應(yīng)商,。
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