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人干擾素誘導(dǎo)蛋白44Elisa試劑盒說明書
人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)Elisa試劑盒,。本說明書將為您提供詳細(xì)的使用指南,以確保您能夠準(zhǔn)確,、有效地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,。請您在使用前仔細(xì)閱讀,并按照步驟進(jìn)行操作,。
一,、產(chǎn)品概述 本試劑盒采用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)的水平。通過純化的抗原包被微孔板,,制成固相抗原,,與待測樣品中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白44結(jié)合,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,。經(jīng)過洗滌后,加入底物TMB顯色,,以測定樣品中IFI44的含量,。
二、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1. 請確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境清潔,,避免污染,。
2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。
3. 準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需的加樣器,、移液管,、試管等器材,并確保其清潔干燥,。
三,、操作步驟
1. 加樣:按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),分別設(shè)置空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上準(zhǔn)確加樣50μl標(biāo)準(zhǔn)品,待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液,,再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣時請注意,樣品應(yīng)加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后,,將酶標(biāo)板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘,。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍,,備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,。每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
6. 再次溫育:同步驟2,。
7. 再次洗滌:同步驟4。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,置37℃避光顯色15分鐘,。
9. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
10. 測定:在加終止液后15分鐘以內(nèi),,使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔的光密度(OD值),。
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