BUNSEN小課堂：實驗室酶標板的使用注意事項

　　根據(jù)不同的分類標準，酶標板有著不同的分類,。

　　一,、根據(jù)孔數(shù)，可分為96孔,、48孔,，其中96孔是現(xiàn)在常用的，因為酶標板就是配合酶標儀用,，現(xiàn)在的酶標儀做出來的最多的是96孔,，所以客戶在購買時也是要96孔板，廠家也為了適應(yīng)市場基本上做出來的就是96孔的,。

　　二,、根據(jù)其底部的不同，又分為平底的,，U型底,、V型底。平底的折射率低,，適于在酶標儀檢測;U型底的酶標板折射率較高,，方便加樣、吸樣,、混勻等操作,，可以不用放在酶標儀上，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng),。V底的酶標板可以精確的吸取樣品,。

　　三、根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,，又分為高結(jié)合力,，中結(jié)合力和氨基化的。

　　1) 高結(jié)合力

　　此種酶標板,，表面經(jīng)處理后,，其蛋白結(jié)合能力大大增強，可達300~400ng IgG/cm2,，主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD,。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng),。抗原或抗體包被后,，以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑,。

　　2) 中結(jié)合力

　　此類酶標板經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結(jié)合,，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2,。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng),。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液,。

　　四、另外根據(jù)顏色又分為透明,、黑色,、白色。

　　透明的是常用的,，用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗,。相對于透明的的板子，還有用于發(fā)光檢測用的不透明的板子,，一般有黑色和白色兩種,。黑色的酶標板自身會有光吸收，所以它的信號相對于白色的板子要低很多,，因此一般用于檢測較強的光,，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學發(fā)光,。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題,。有些客戶會問，用一般的酶標板可不可以進行發(fā)光檢測,，回答是不可以的,，因為一般從化學發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性的，也就是說各個方向上同等發(fā)射出來的,。如果用透明的板子,，光不僅會從垂直方向發(fā)散，還從水平方向發(fā)散出來,。很容易的就會通過各個孔之間的間隙和孔壁,。這樣的話，光較強時相鄰孔之間的影響就會很大,，因此不能用透明的酶標板來進行化學發(fā)光實驗,。

　　五、一般酶標板大多是可以拆卸的,，也就是單條可以拆下來,，也有固定的板子。單條可拆的的板子其實可以省下許多錢,，因為這樣的話,，當你想用新的酶標板時，可以將酶標板條拆下來,，買些酶標板條就可以了,，只是要考慮要配相同的型號即可。另外,，可拆的酶標板可以用來做體外檢測,，方便拆卸。

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