實(shí)驗(yàn)室酶標(biāo)板的使用注意事項(xiàng)

　　根據(jù)不同的分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn),，酶標(biāo)板有著不同的分類(lèi),。

　　一,、根據(jù)孔數(shù),，可分為96孔、48孔,，其中96孔是現(xiàn)在常用的,，因?yàn)槊笜?biāo)板就是配合酶標(biāo)儀用，現(xiàn)在的酶標(biāo)儀做出來(lái)的最多的是96孔,，所以客戶(hù)在購(gòu)買(mǎi)時(shí)也是要96孔板,，廠家也為了適應(yīng)市場(chǎng)基本上做出來(lái)的就是96孔的。

　　二,、根據(jù)其底部的不同,，又分為平底的，U型底,、V型底,。平底的折射率低,，適于在酶標(biāo)儀檢測(cè);U型底的酶標(biāo)板折射率較高，方便加樣,、吸樣,、混勻等操作，可以不用放在酶標(biāo)儀上,，直接通過(guò)目測(cè)觀察顏色變化情況,，從而判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標(biāo)板可以精確的吸取樣品,。

　　三、根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,，又分為高結(jié)合力,，中結(jié)合力和氨基化的。

　　1) 高結(jié)合力

　　此種酶標(biāo)板,，表面經(jīng)處理后,，其蛋白結(jié)合能力大大增強(qiáng)，可達(dá)300~400ng IgG/cm2,，主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD,。使用該類(lèi)酶標(biāo)板可提高敏感性，并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量,，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng),。抗原或抗體包被后,，以非離子去污劑無(wú)法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,，需使用蛋白作為封閉劑。

　　2) 中結(jié)合力

　　此類(lèi)酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結(jié)合,，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,，其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類(lèi)酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,，可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類(lèi)板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液,。

　　3)氨基化

　　這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,，其疏水鍵由親水鍵取代。該類(lèi)酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體,。使用合適的緩沖液和pH值,，其表面可通過(guò)離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過(guò)其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力,，可用于固定溶于Triton-100,、Tween 20等去污劑的蛋白分子,。該類(lèi)板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無(wú)法結(jié)合;此外,，其表面需有效地封閉,。由于親水和共價(jià)的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用,。

　　四,、另外根據(jù)顏色又分為透明、黑色,、白色,。

　　透明的是常用的，用于最一般的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn),。相對(duì)于透明的的板子,，還有用于發(fā)光檢測(cè)用的不透明的板子，一般有黑色和白色兩種,。黑色的酶標(biāo)板自身會(huì)有光吸收,，所以它的信號(hào)相對(duì)于白色的板子要低很多，因此一般用于檢測(cè)較強(qiáng)的光,，如熒光檢測(cè),。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測(cè),，常用于一般的化學(xué)發(fā)光,。另外黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來(lái)的問(wèn)題。有些客戶(hù)會(huì)問(wèn),，用一般的酶標(biāo)板可不可以進(jìn)行發(fā)光檢測(cè),，回答是不可以的，因?yàn)橐话銖幕瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性的,，也就是說(shuō)各個(gè)方向上同等發(fā)射出來(lái)的,。如果用透明的板子，光不僅會(huì)從垂直方向發(fā)散,，還從水平方向發(fā)散出來(lái),。很容易的就會(huì)通過(guò)各個(gè)孔之間的間隙和孔壁。這樣的話(huà),，光較強(qiáng)時(shí)相鄰孔之間的影響就會(huì)很大,，因此不能用透明的酶標(biāo)板來(lái)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)。

　　五,、一般酶標(biāo)板大多是可以拆卸的,，也就是單條可以拆下來(lái)，也有固定的板子,。單條可拆的的板子其實(shí)可以省下許多錢(qián),，因?yàn)檫@樣的話(huà),，當(dāng)你想用新的酶標(biāo)板時(shí)，可以將酶標(biāo)板條拆下來(lái),，買(mǎi)些酶標(biāo)板條就可以了,，只是要考慮要配相同的型號(hào)即可。另外,，可拆的酶標(biāo)板可以用來(lái)做體外檢測(cè),，方便拆卸。

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