ELISA試劑盒試驗(yàn)洗板機(jī)洗板的具體步驟有那些,？
 

　　為了保證ELISA試劑盒試驗(yàn)的穩(wěn)定及順利完成,，下面BUNSEN本生給大家講解使用洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)注意以下三個(gè)步驟,。

　　1,、洗滌參數(shù)

　　主要的參數(shù)是洗滌量。自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液,。如果你之前遭遇過高背景,，那么不要猶豫，將洗滌量調(diào)為高,，比包被體積更高,。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景,。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同,。

　　ELISA試劑盒的使用手冊中列出包被量。我們建議使用350µl洗滌液進(jìn)行洗滌,，以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁,。一般來說，洗滌量越高,，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少,。

　　2、洗滌次數(shù)

　　影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量,。當(dāng)然,，洗滌次數(shù)越多，背景越低。然而,，太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度,，使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次,。不過,，一般而言，包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少,。對(duì)于用戶包被的ELISA板,，必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。

　　控制洗滌量和洗滌次數(shù)的另一種方法是加入過量的洗滌液,。一般來說,，96孔板的每個(gè)孔能容納330至460 µl。不過,，有些自動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)置程序,，分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)量的洗滌液，比如1 ml,。它是如何做到的呢?其實(shí)很簡單,，就是在分液的同時(shí)打開吸液功能。換句話說,，隨著分液器分配更多的液體,，抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量,，但不會(huì)溢出到其他孔中,。

　　3、抽 吸

　　還有一些參數(shù)會(huì)影響洗滌步驟的效果,。這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,，這兩者都能調(diào)整，以降低背景(殘留量)和差異,。

　　殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體,，它們會(huì)增加背景信號(hào)。殘留量越小,，殘留液體越少,，轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少。

　　吸液高度會(huì)明顯影響殘留量;如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大,，那就會(huì)讓殘留量急劇增加,。反之，如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部,，那么也會(huì)使吸液效率降低,，殘留量增加。

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