電泳定義:帶電顆粒子在電場(chǎng)作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng),,稱為電泳(electrophoresis, EP),,在確定的條件下,帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度作用下,,單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離(遷移率)為固定值,。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,,在同一電場(chǎng)中電泳,,經(jīng)一定時(shí)間后,由于移動(dòng)距離不同而相互分離。分開(kāi)的距離與外加電場(chǎng)的電壓與電泳時(shí)間成正比,。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù),。
電泳的應(yīng)用:電泳設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便,,具有高分辨率及選擇性特點(diǎn),,已日益廣泛地應(yīng)用于分析化學(xué)、生物化學(xué),、臨床化學(xué),、毒劑學(xué)、藥理學(xué),、免疫學(xué),、微生物學(xué)、食品化學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域 ,。
核酸電泳實(shí)驗(yàn)過(guò)程 :
制膠:
1,、制備配膠液:5分鐘
2、稱量瓊脂糖:3-5分鐘
3,、微波爐融化:10-15分鐘
4,、溶液冷卻至60度:8-10分鐘
5、倒膠冷卻:30-40分鐘
6,、清洗設(shè)備:5分鐘
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法,。對(duì)于分子量較大的樣品,如大分子核酸,、病毒等,,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝 膠進(jìn)行電泳分離。
注意事項(xiàng):
1,、技術(shù)工業(yè)生產(chǎn),,預(yù)制膠濃度非常準(zhǔn)確,但比實(shí)際客戶自配濃度低(微波爐加熱失水過(guò)多等),,需要客戶測(cè)試選用合適的濃度產(chǎn)品,。
2、體系為T(mén)AE,,跟客戶自配的TAE兼容,,可以直接使用,建議換成Mydeer包裝的TAE電泳液,。不能在TBE或其他體系類電泳液中使用,。
3、電壓為客戶之前使用TAE瓊脂糖膠的電壓,,或者微調(diào)整一下,。