低吸附離心管的一些關(guān)鍵點(diǎn)，看完這些讓你不踩坑,！

時(shí)間：2021/12/20閱讀：3307

　　低吸附離心管常用于對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮和除鹽操作,，對(duì)色譜洗液和生理梯度片斷進(jìn)行緩沖液交換或者除鹽操作，從細(xì)胞的細(xì)菌培養(yǎng)上清液或者溶菌液中回收生物分子,。清洗和濃縮乳膠懸浮液,，離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,，特別是較稀的蛋白溶液來說,，用膜濃縮，回收率常常是不定量的,，雖然PES材料使非特異性吸附最小化,，但是，某些蛋白,，特別是稀的時(shí)候會(huì)有問題,，非特異性結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同，含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面,。

　　低吸附離心管離心時(shí)注意事項(xiàng)：避免過長(zhǎng)時(shí)間或者高速離心,，雖然我們產(chǎn)品有防死端設(shè)計(jì)，可避免過度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附,，避免過度濃縮,，終體積越小，越容易因表面吸附而損失得率,，離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,，必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面，有助于減少膜表面吸附,，能提高回收率,，盡量避免TIPS接觸膜表面。

　　對(duì)于低吸附離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,，大多數(shù)情況下,，在濃縮稀釋蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率，因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn),，鈍化的方法是預(yù)先用高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子一小時(shí)以上,，蒸餾水*沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以*除去可能殘留在膜上的鈍化溶液,，注意鈍化處理后別讓膜干了,，如果要留待以后使用,，需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。