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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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您可知elisa試劑盒采用了哪些洗板方法@本生資訊

時(shí)間:2020/7/23閱讀:2075
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您可知elisa試劑盒采用了哪些洗板方法,?

ELISA試劑盒中的樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度規(guī)范品的均勻OD值,,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%;

制造規(guī)范曲線;

均勻OD值減去空白孔的OD值,。

以減去底后的OD值為X軸,規(guī)范品的濃度為Y軸,,利用作圖軟件得出一個(gè)適宜的計(jì)算辦法,。主張運(yùn)用適宜的軟件來(lái)作圖,,這款軟件能夠給出許多種辦法,并從中挑選一條適宜的方程,,要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)符合,,能夠?qū)⒁?guī)范品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,,計(jì)算出規(guī)范品的濃度,,得到的成果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近。

假如出現(xiàn)規(guī)范曲線的線性欠好,,或平行性欠好(雙孔對(duì)照孔的OD值差別很大),,或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象,可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間相互污染,、洗板后未能趕快進(jìn)行下一步操作,、增加樣品或其它試劑時(shí)操作的辦法不對(duì)、孵育方位避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā),、酶標(biāo)板孔問參加的試劑量不同,,相對(duì)應(yīng)的解決辦法是加樣時(shí)請(qǐng)當(dāng)心勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時(shí)也請(qǐng)當(dāng)心,,勿將洗滌液濺人另一微孔中,、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、增加試劑時(shí)請(qǐng)懸空滴入,,切記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi),,汲取不同試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次槍頭、承認(rèn)孵育環(huán)境不透光,,蓋板膜將酶標(biāo)板密封好,、運(yùn)用已校正過的微量加樣器。

ELISA試劑盒可以采用:

手工洗板方法:吸去或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,,在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,將推薦的洗滌緩沖液至少0.4毫升注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。

在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,。

剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

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