本生生物帶您了解ELISA試劑盒實驗重要的步驟

　　elisa試劑盒是一種敏感性高,，特異性強，重復性好的實驗診斷方法,。雖然elisa試劑盒的操作步驟看似簡單,，但沒做到位的話就會影響實驗的效果。所以elisa試劑盒實驗時至關重要的步驟有：

　　一,、重要的洗滌

　　不充分的洗滌會導致差異和高背景,，從而帶來不理想的實驗結果。如果未結合的材料殘留在微孔板中,，那么它會增加背景噪音。有必要的話,，可增加洗滌液中的鹽濃度,，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,，懷疑洗滌不夠時,，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

　　二,、關鍵的封閉

　　封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點,。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。如果背景過高,，懷疑封閉不充分,，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間,。

　　目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑,。使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑,、吸附的抗原,、抗體和檢測試劑,。好的封閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原,、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用,。

　　三、抗體濃度須優(yōu)化

　　如果試劑稍有不同,，則可能需要優(yōu)化抗體的量,。非特異的抗體結合會增加背景。為了防止這一點,，切勿使用過多的一抗或二抗,。

　　四、檢測試劑要適量

　　切勿使用過多的檢測試劑,。如果濃度過高,，或者未正確稀釋，則會導致高背景,。也不要顯色過度,，如有必要，優(yōu)化一下何時應加入終d止液,。

　　只有確保每一步操作都做到位,，才會呈現(xiàn)完美的實驗結果。所以elisa實驗的每一步都很重要,，不可以掉以輕心,。