藥品生產(chǎn)中滅菌工藝的驗證與滅菌效果的監(jiān)控，是影響產(chǎn)品安全性的關(guān)鍵要素,，也是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）檢查中的關(guān)注重點,。無菌制劑的過度滅菌可能引入更多雜質(zhì)，誘發(fā)質(zhì)量與安全隱患,，而滅菌不充分則可能因微生物污染而導(dǎo)致藥害事件,。今天，就帶大家簡單了解下衡量滅菌工藝的標尺——滅菌生物指示劑的相關(guān)知識,。

 滅菌工藝驗證和滅菌效果監(jiān)控中使用的生物指示劑,，是衡量滅菌工藝的一把尺，此類產(chǎn)品的質(zhì)量直接影響到滅菌工藝的關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)和產(chǎn)品安全性,。

D值與Z值的意義與重要性：

   D值和Z值是評價滅菌生物指示劑產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù),。D值即在規(guī)定滅菌溫度下，將生物指示劑產(chǎn)品中耐熱微生物殺滅90%（下降一個對數(shù)單位）所需的時間,。D值越大,，耐熱微生物殺滅速度越慢，該菌株的耐熱性越強,。Z值是指使某種微生物的D值下降一個對數(shù)單位里,，滅菌溫度需要升高的度數(shù)，Z值越大,，因溫度上升而取得的殺菌效果越小,。

D值如何測定：

　實驗步驟如下：產(chǎn)品在121℃下滅菌，設(shè)計不同的暴露時間,，覆蓋全部陽性反應(yīng),、全部陰性反應(yīng)和部分陽性、陰性反應(yīng)的區(qū)間,。每個暴露時間點所用的待測生物指示劑樣品為20支，每次暴露的樣品批次和數(shù)量相同,。每次暴露程序完成后,，立即按壓玻璃管，使培養(yǎng)基與含菌紙片充分接觸,，55℃培養(yǎng)48h,，記錄陽性/陰性反應(yīng)的指數(shù)。試驗重復(fù)3次,，計算平均值和標準偏差,。

　存活孢子計數(shù)是計算D值的關(guān)鍵參數(shù)，存活孢子計數(shù)結(jié)果的準確性取決于待測樣本的均勻性、耐熱菌株孢子與載體的分離程度,、熱擊的溫度和時間,、稀釋劑的選擇等。

　稀釋液中的離子強度會直接影響孢子的復(fù)蘇率,，因此推薦使用滅菌純化水作為稀釋液,。試驗優(yōu)化時需以滅菌生理鹽水，含吐溫-80的滅菌生理鹽水等作為稀釋劑進行孢子復(fù)蘇率的考察,。

　此外,，濕熱滅菌生物指示劑產(chǎn)品所選取的耐熱菌株嗜熱脂肪芽孢桿菌的遺傳背景、產(chǎn)品包裝材質(zhì)和復(fù)蘇培養(yǎng)基適用性也會對D值測定的結(jié)果產(chǎn)生一定影響,，但產(chǎn)品制作工藝中耐熱菌株的選擇,、耐熱菌株與載體的包被、菌株耐熱能力對產(chǎn)品D值也會產(chǎn)生一些波動影響,。

 小結(jié)：

　滅菌生物指示劑產(chǎn)品的D值本身取決于產(chǎn)品制作過程中耐熱菌株的抗性,，D值測定結(jié)果收到暴露溫度、暴露壓力,、升溫或降溫速率,、溫度寶東興、產(chǎn)品包裝形式,、復(fù)蘇培養(yǎng)基的適用性等因素影響,。