不銹鋼開口直壁容器10L(蛔蟲卵測定)由上海書培實驗設備有限公司提供,,專門用于蛔蟲卵測定沉淀集卵法的*耗材,其它相關耗材包括(提供冰箱,、篩網(wǎng),、不銹鋼開口直壁容器、開口直壁量筒,、螺口尖底離心管,、離心機、一次性巴氏滴管,、漩渦混勻器,、顯微鏡,、定量計數(shù)框1ml網(wǎng)格和定量計數(shù)框5ml S型)。
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:不銹鋼開口直壁容器10L(蛔蟲卵測定)
規(guī)格:10L
材質(zhì):304不銹鋼加厚
用途:蛔蟲卵測定沉淀集卵法,,水質(zhì)檢測常用耗材
相關耗材:
冰箱,、離心機、顯微鏡,、漩渦混勻器
篩網(wǎng),、不銹鋼開口直壁容器、開口直壁量筒,、
螺口尖底離心管,、一次性巴氏滴管
定量計數(shù)框1ml網(wǎng)格和定量計數(shù)框5ml S型)
廢物處理:實驗的虹吸液煮沸10分鐘后可按普通廢物處理,含乙酸乙酯的廢液按危險廢物處理,。
注意事項:實驗操作人員要注意自身防護,,避免蛔蟲卵的污染。
蛔蟲卵測定 沉淀集卵法:
蛔蟲卵分受精卵和未受精卵,。受精卵呈寬橢圓形,。蛔蟲卵一旦進入人體,,在它發(fā)育到成熟的整個過程中都會給人體造成危害,。蛔蟲卵在土壤,、肥料,、人體等自然界廣泛存在!防止糞便污染環(huán)境是切斷蛔蟲傳播途徑的重要措施,。
蛔蟲卵死亡率直接影響肥料的效果,,可采用五格三池貯糞法,使糞便中蟲卵大部分沉降在池底,。由于糞水中游離氨的作用和厭氧發(fā)酵,,蟲卵可被殺滅,同時也會增加肥效,。在用于糞做肥料的地區(qū),,可采用泥封堆肥法,三天后,,糞堆內(nèi)溫度可上升至52℃或更高,,可以殺死蛔蟲卵。
那么蛔蟲卵死亡率又是如何測定的呢,?依據(jù)GB/T 19524.2—2004如下:將堿性溶液與肥料樣品充分混合,,分離蛔蟲卵,然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液,,使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面,,從而收集檢驗,。
1、蛔蟲卵分離
稱取5.0~10.0 g樣品(顆粒較大的樣品應先進行研磨),,放于容量為50 mL離心管中,,注入NaOH溶液25~30 mL,另加玻璃珠約10粒,用橡皮塞塞緊管口,,放置在振蕩器上,,靜置30 min后,以200~300 r/ min頻率振蕩10~15 min,。振蕩完畢,,取下離心管上的橡皮塞,用玻璃棒將離心管中的樣品充分攪勻,,再次用橡皮塞塞緊管口,,靜置15~30 min 后,振蕩10~15 min,。
2,、離心沉淀
從振蕩器上取下離心管,,拔掉橡皮塞,,用滴管吸取蒸餾水,將附著于橡皮塞上和管口內(nèi)壁的樣品沖入管中,,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min后,,棄去上清液。然后加適量蒸餾水,,并用玻璃棒將沉淀物攪起,,按上述方法重復洗滌三次。
3,、 離心漂浮
往離心管中加入少量飽和 NaNO3 溶液,,用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后,再徐徐添加飽和 NaNO3 溶液,,隨加隨攪,,直加到離管口約1 cm為止,用飽和 NaNO3 溶液沖洗玻璃棒,,洗液并入離心管中,,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min。
用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中,,約30次后,,適當增加一些飽和NaNO3 溶液于離心管中,再次攪拌,、離心及移置液膜,,如此反復操作3~4次,,直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。
4,、抽濾鏡檢
將燒杯中混合懸液,,通過覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大,,可更換濾膜,。
抽濾完畢,用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺上小心取下,,置于載玻片上,,滴加二、三滴甘油溶液,,于低倍顯微鏡下對整張濾膜進行觀察和蛔蟲卵計數(shù),。當觀察有蛔蟲卵時,將含有蛔蟲卵的濾膜進行培養(yǎng),。
5 ,、培養(yǎng)
在培養(yǎng)皿的底部平鋪一層厚約1 cm 的脫脂棉,脫脂棉上鋪一張直徑與培養(yǎng)皿相適的普通濾紙,。為防止霉菌和原生動物的繁殖,,可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水,以浸透濾紙和脫脂棉為宜,。
將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上,,培養(yǎng)皿加蓋后置于恒溫培養(yǎng)箱中,在28 ℃~30 ℃ 條件下培養(yǎng),,培養(yǎng)過程中經(jīng)常滴加蒸餾水或甲醛溶液,,使濾膜保持潮濕狀態(tài)。
6,、 鏡檢
培養(yǎng)10~15 d ,,自培養(yǎng)皿中取出濾膜置于載玻片上,滴加甘油溶液,,使其透明后,,在低倍鏡下查找蛔蟲卵,然后在高倍鏡下根據(jù)形態(tài),,鑒定卵的死活,,并加以計數(shù)。鏡檢時若感覺視野的亮度和膜的透明度不夠,,可在載玻片上滴一滴蒸餾水,,用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣,與水混合均勻,蓋上蓋玻片進行鏡檢,。
7,、 判定
凡含有幼蟲的,都認為是活卵,,未孵化或單細胞的都判為死卵,。
8、 結果計算
式中:
K —蛔蟲卵死亡率(%)
N1—鏡檢總卵數(shù)
N2—培養(yǎng)后鏡檢活卵數(shù)