流動相為什么要過濾呢,?
*,,色譜體系是一種精密的設備,,對結果的精確性要求也很高,,因而,因為色譜體系的精密性和對結果分析的精確性要求,,對樣品的過濾顯得尤為重要,。咱們在樣品制備的每步不可漫不經(jīng)心。正如液相色譜體系的說明書中所要求的,,活動相得須使用HPLC的試劑,,且使用前須過濾。
為什么要減壓過濾,?
過濾能夠維護色譜體系和色譜柱,,長柱子的使用壽命,改善數(shù)據(jù)的精度,。過濾能夠消因為摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動。同時,,過濾也能夠去活動相中的顆粒雜質(zhì),,免它們對內(nèi)密封圈形成危害,,或阻塞小孔管道,、層析柱、線內(nèi)過濾器及維護柱,。
一般活動相在上儀器前須經(jīng)過兩個步驟:減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個意圖,
一個是過濾掉氣體,,尤是有機相和水相混合的時分,會產(chǎn)生很多的氣泡,。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱,所以要除去,。
一個是過濾掉不溶性微粒,。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的,,這個是針對你的色譜柱而定的,。色譜柱一般是5um的粒徑,,過濾的活動相里邊小的毛絮啊,顆粒啊不會進入色譜柱,。
超聲的首要意圖也是為了脫氣,,另外還助令溶液混合均勻等效果。不過超聲首要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡,,所以沒要超聲太久的時間,,3-5min夠了。
總而言之,,都是為了維護儀器和色譜柱,,防氣泡和雜質(zhì)進入。
過濾用什么,?
一般建議使用的過濾器?;蛟S有人以為,,過濾裝置貌似挺貴,算了,買個砂芯漏斗得了,。哎,,同學,這么貴的房子都買了,,還在乎一把鎖,?
使用的活動相過濾器,簡單,,而且全,。
怎么過濾?
只需按照下圖的說明,,依次放置好濾器和管線,,再發(fā)動真空泵可開始過濾。
在操作過程中,,有一點需要留意,,須用枯燥的過濾膜和枯燥的支撐底座進行過濾,以防空氣在膜上形成氣阻,,這個阻力可使液體流速下降或阻撓液體流出,。在將過濾膜放在濾器上之前,須保濾器是清潔,、枯燥的,。