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液相壓力波動(dòng)
在正常情況下,，HPLC一般的壓力波動(dòng)范圍在5%以內(nèi)，而UPLC可達(dá)1以內(nèi),。壓力波動(dòng)大會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)物質(zhì)保留時(shí)間漂移,，從而影響分析結(jié)果的重現(xiàn)性。今天,，就跟著小編來看看如何找到引起波動(dòng)的原因,。

溶劑進(jìn)口過濾芯堵塞，溶劑未脫氣,，泵的密封墊老化,，出口單向閥失效，主動(dòng)閥失效,。
常見的原因是：泵內(nèi)有氣泡
排氣泡原因
平衡方法前灌注不充分,，管路中有氣泡，會(huì)引起壓力波動(dòng),。因此充分的灌注是液相正常運(yùn)行的基礎(chǔ),。 
有時(shí)候，溶劑濾頭不清潔也會(huì)導(dǎo)致氣泡容易被吸進(jìn)管路造成壓力波動(dòng),。如懷疑濾頭,，可在保溶劑潔凈的前提下，拔下溶劑濾頭,，將溶劑管路直接放入溶劑瓶排查,。確認(rèn)溶劑濾頭臟時(shí)可超聲清洗。

小貼士
溶劑濾頭在流動(dòng)相進(jìn)入溶劑管路之前,，起到過濾流動(dòng)相中固體顆粒保護(hù)儀器的作用,。如果溶劑品質(zhì)不佳，長期使用會(huì)引起濾頭堵塞,，進(jìn)而導(dǎo)致氣泡易被吸進(jìn)系統(tǒng)而引起壓力波動(dòng),。

清洗步驟

1色譜純異丙醇超聲清洗10 min
2色譜級甲醇和超純水各50%超聲清洗15 min
如果按照上述步驟清洗后效果不佳，可使用30%的色譜級磷酸超聲清洗15 min～30 min,。需要注意的是,，使用磷酸后，應(yīng)使用超純水反復(fù)清洗濾頭直至pH呈中性,，再用色譜純甲醇超聲浸潤后裝回,。

觀察壓力波動(dòng)范圍
若排氣泡原因后壓力仍波動(dòng)，建議觀察波動(dòng)范圍,。
?若壓力曲線呈鋸齒狀,，波動(dòng)范圍較大,，甚至降0，多優(yōu)先考慮單向閥粘滯,；
?波動(dòng)范圍相對較小,，多在20%以內(nèi)，優(yōu)先考慮泵頭磨損,。

單向閥粘滯
懷疑單向閥粘滯時(shí)：
? HPLC可以嘗試超聲清洗單向閥,，超聲無效時(shí)建議換新單向閥；
? UPLC儀器單向閥超聲效果不明顯,，一般建議換,。

泵頭磨損
泵頭磨損是指泵頭內(nèi)的泵桿與泵桿密封圈磨損。
■ HPLC泵頭磨損
? 未配置柱塞清洗(Seal Wash)管路的HPLC,，發(fā)生泵頭磨損時(shí)一般可從泵頭底部的小孔觀察到滲液,；
? 配置了柱塞清洗管路的HPLC，可通過持續(xù)觀察Seal Wash廢液管來排查,，幾秒一滴且持續(xù)的滴液說明有滲漏,。

換Alliance泵桿與密封

■ UPLC泵頭磨損
UPLC流速偏低且輕微磨損會(huì)產(chǎn)生比較大的壓力波動(dòng)，所以通過觀察Seal Wash的方法不太適用,。推薦用戶做滲漏測試（Leak Test）來判斷,。

壓力過低 

可能的原因：溶劑進(jìn)口過濾芯堵塞，連接管路泄漏或其它備件（泵頭密封墊）,，溶劑或流速改變,，主動(dòng)閥失靈，四元比例閥失靈,，單向出口閥失靈,，色譜柱失效（固定相流失）

壓力過高 

可能的原因：柱子進(jìn)口過濾芯被污染，PURGE閥過濾芯被污染,，色譜柱被污染，連接管路,，尤其是針座毛細(xì)管堵塞,，進(jìn)樣器旋轉(zhuǎn)密封閥被堵塞，進(jìn)樣針或針座被阻塞,。

Tips
1溶劑品質(zhì)不合格或鹽濃度過高析出會(huì)引起單向閥粘滯或泵頭磨損,。
2溶劑濾頭、單向閥,、泵桿及密封均屬于易損易耗件,，建議定期換。