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培養(yǎng)基配制及時(shí)滅菌的重要性
培養(yǎng)基,，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的,，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),。一般有碳源、氮源,、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）,、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)并促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的適宜生存營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,。所以，在培養(yǎng)基配制好后需要立即滅菌,，大限度減少有效營(yíng)養(yǎng)成分的流失,。
培養(yǎng)基種類(lèi)很多，根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基,、合成培養(yǎng)基,、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基,、液體培養(yǎng)基,、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、選擇培養(yǎng)基,、富集培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等,；根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基,、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基,、真菌培養(yǎng)基等,。
培養(yǎng)基配成后一般需進(jìn)行性能測(cè)試并調(diào)節(jié)pH，還須進(jìn)行滅菌,，通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌,。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì),。配好后不宜久置,，推薦現(xiàn)配現(xiàn)用,。
培養(yǎng)基制備過(guò)程
1.配料
配方換算→在容器中加入少量蒸餾水→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→溶解煮沸
2.溶解
加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,，一定要煮沸,，瓊脂的熔解溫度95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌,，推薦老師們使用磁力加熱攪拌器,，以防止燒焦并避免操作人員燙傷。
3.調(diào)PH
用1mol鹽酸或1mol氫氧化鈉溶液,，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值到所適宜的范圍內(nèi),。
4.過(guò)濾
濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。（現(xiàn)在以不常見(jiàn)）
5.分裝
一般培養(yǎng)基放在三角瓶,、試劑瓶或試管中進(jìn)行滅菌,，待冷卻后使用。有部分特殊培養(yǎng)基,，需要滅菌后,，靜置冷卻至45-48攝氏度，加入無(wú)菌輔料（如脫纖維羊血）,。
(1) 液體培養(yǎng)分裝
若作靜置液體培養(yǎng),，則100ml培養(yǎng)基/150ml的三角瓶或125ml旋口瓶。Tuttnauer滅菌器有*的液體滅菌程序,，能提高單瓶的有效裝載容積,，從而提高培養(yǎng)基的配置數(shù)量，以此在培養(yǎng)基性能測(cè)試中,，為用戶節(jié)約更多花費(fèi),。
三角瓶，否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,，造成染菌,；若作搖瓶培養(yǎng)，則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,，保證通氣良好。
(2) 固體培養(yǎng)基
固體培養(yǎng)基則200ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶或旋口瓶,，420ml培養(yǎng)基/500ml旋口瓶,，約單瓶的4/5高度；固體斜面培養(yǎng)基一般裝5-6ml,，約試管的1/3高度,。
6.包扎
分裝好后的三角瓶塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好,，防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕,。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌時(shí)溫度不穩(wěn)定,，會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)成分被高溫分解,，培養(yǎng)基中的碳源、微量氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深,，造成同種培養(yǎng)基不同批次的顏色各不相同,。這時(shí)培養(yǎng)基性能測(cè)試報(bào)告該如何完成，廢棄成本高昂,，繼續(xù)使用影響測(cè)試結(jié)論怎么辦,？用Tuttnauer滅菌器，能為您提供的溫度控制,，從根本上解決您的煩惱,。
8.擺斜面
滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個(gè)斜面,，約占試管長(zhǎng)度的2/3,。
9.貯存
固體培養(yǎng)基帶凝固后和液體培養(yǎng)基冷卻至室溫存放于2-8℃冰箱中備用。
10.培養(yǎng)基性能測(cè)試
不管什么類(lèi)型的培養(yǎng)基,，都需要進(jìn)行培養(yǎng)基性能測(cè)試,。目的有二，一是確保高壓滅菌后的培養(yǎng)基是*無(wú)菌的,；二是確保培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分能使細(xì)胞或微生物能健康生長(zhǎng),。一個(gè)完整的培養(yǎng)基性能測(cè)試，應(yīng)該包括陽(yáng)性生長(zhǎng)測(cè)試,、陰性菌生長(zhǎng)測(cè)試和無(wú)菌性能測(cè)試,。
培養(yǎng)基配制好后為什么必須立即滅菌？
大家都知道,，培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng),、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料,。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型,，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同,，所以培養(yǎng)基的種類(lèi)很多,，使用的原料也各有差異。為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)和研究的目的,，要按照培養(yǎng)基的配方進(jìn)行配制,。而任何一種培養(yǎng)基制成后應(yīng)及時(shí)*滅菌，以備培養(yǎng)使用,。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌,。
發(fā)酵過(guò)程中,，培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個(gè)原因：如不滅菌或滅菌不*，會(huì)使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物,，會(huì)因環(huán)境菌的生長(zhǎng)而消耗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，造成生產(chǎn)能力的下降；環(huán)境菌會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,，這就會(huì)特定產(chǎn)物的提取更加困難,，造成提純率降低，產(chǎn)品質(zhì)量下降,；環(huán)境菌大量繁殖后,，會(huì)改變反應(yīng)液的pH值，使反應(yīng)異常,；有些環(huán)境菌會(huì)分解產(chǎn)物,，使生產(chǎn)失敗,；如果發(fā)生噬菌體污染,，生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解，使生產(chǎn)失敗,。
培養(yǎng)基滅菌是殺滅培養(yǎng)基中本身的原宿菌群或在空氣中附著的環(huán)境菌,，更好的讓目標(biāo)菌生長(zhǎng)(減少環(huán)境菌消耗培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且有些環(huán)境菌生長(zhǎng)使會(huì)產(chǎn)生抑制目標(biāo)菌生長(zhǎng)的特殊產(chǎn)物),。一般人工培養(yǎng)細(xì)胞或細(xì)菌,，基本上是盡可能讓其生長(zhǎng)快速或者產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，因此就讓其在適培養(yǎng)基上生長(zhǎng),，以縮短培養(yǎng)時(shí)間與提高經(jīng)濟(jì)效益,。其中，在生產(chǎn)前進(jìn)行培養(yǎng)基性能測(cè)試的意義,，直觀的顯現(xiàn)就是避免,，生產(chǎn)成本的浪費(fèi)，簡(jiǎn)言之就是以小博大,。
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*、滅菌效果強(qiáng),、安全性高,、可選配真空干燥功能、防止培養(yǎng)基爆沸功能,、全壽命長(zhǎng)（曾有客戶使用超過(guò)18年）,，是具備《進(jìn)口壓力容器生產(chǎn)許可證》,、《進(jìn)出口鍋爐壓力容器安全性能檢驗(yàn)證書(shū)》,、《計(jì)量證書(shū)》等證書(shū)齊全的滅菌器,。
Tuttnauer全自動(dòng)高壓蒸汽滅菌器開(kāi)關(guān)門(mén)輕松簡(jiǎn)便，艙門(mén)僅在通電時(shí)才可開(kāi)啟,，避免因斷電或關(guān)機(jī)時(shí)意外泄漏未滅菌物質(zhì),。高壓蒸汽滅菌器全彩顯示屏清晰顯示同時(shí)更加直觀的顯示，滅菌過(guò)程各階段所處的狀態(tài),，溫度,、壓力、程序及操作過(guò)程中的其它相關(guān)信息,。高壓蒸汽滅菌器脈動(dòng)真空時(shí),，腔室內(nèi)空氣凈化經(jīng)過(guò)超濾過(guò)濾器再排出腔體外，避免腔內(nèi)為滅菌氣體外溢,，減少環(huán)境中的二次污染情況的發(fā)生,，更好的保護(hù)操作人員。在壓力與溫度匹配時(shí),，腔體內(nèi)是有兩只可移動(dòng)的物料探頭可以更加的控制溫度,，從而產(chǎn)生過(guò)飽和蒸汽壓保證滅菌效果。高壓蒸汽滅菌器可根據(jù)被滅菌物質(zhì)性狀決定降溫速率從而縮短滅菌過(guò)程的單位時(shí)間,。如液體裝載滅菌時(shí)采用快速冷卻功能,，通過(guò)在腔體外壁上緊緊盤(pán)繞的冷卻管中流動(dòng)的自來(lái)水，快速帶走腔體內(nèi)的熱量,，同時(shí)培養(yǎng)基不會(huì)因此發(fā)生爆沸的情況,，縮短滅菌過(guò)程時(shí)間，提高滅菌器的使用效率,。
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