日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：埃博拉病毒 (EBOV)核酸檢測試劑盒(熒光 PCR 法) 

Name：Ebola Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】25T/盒,、50T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測血液中的埃博拉病毒，用于埃博拉病毒感染的輔助診斷,，其檢測結(jié)果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術(shù),，設(shè)計一對埃博拉病毒 RNA 的特異性引物,，結(jié)合一條特異性探針，用熒光 PCR 技術(shù)對埃博拉病毒的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,，用于科研實驗中對可疑感染者的病原學(xué)檢測,。

【試劑組成】

包裝規(guī)格25T/盒50T/盒

EBOV 反應(yīng)液500μL×1 管500μL×2 管

酶液25μL×1 管50μL×1 管

EBOV 陽性質(zhì)控品250μL ×1 管250μL ×1 管

陰性質(zhì)控品250μL ×1 管250μL ×1 管

說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,，避光保存,、運輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,，有效期 12 個月,。

【適用儀器】

ABI7500 ,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。

【標(biāo)本采集】

疑似感染病人的靜脈血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。

【保存和運輸】

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h,；若需長期保存,，應(yīng)放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次,。

【使用方法】

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

2000rpm 離心 5min,，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中

1.2核酸提取

推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取試劑（離心柱法）進(jìn)行核酸提取，請按照試劑說明書    進(jìn)行操作,。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份),，每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑EBOV 反應(yīng)液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）19μL1μL

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，20μL/管,。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,，蓋好管蓋,，混勻， 短暫離心,。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,；

熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE,，請勿選擇 ROX 參比熒光,。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11 cycle52℃10min否

21 cycle95℃2min否

3

45 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整，Start 值可設(shè)在 3～15,、End 值可設(shè)在 5～20,，使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果,。

5.2結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結(jié)果無 Ct 值,，且無特異性擴(kuò)增曲線；

可疑：樣本檢測結(jié)果 40＜Ct 值≤45,，建議重復(fù)檢測,，如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45，且曲線有明顯的增長曲線,，判定為陽性,，否則為陰性。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無特異性擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示,；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時滿足,，否則實驗視為無效,。

6.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關(guān),；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

3.陽性對照,、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果,；

6.試劑運輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果,；

7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

【注意事項】

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進(jìn)行處理,。