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Morris水迷宮(Morris water maze, MWM)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動物(大鼠,、小鼠)游泳,,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺的一種實(shí)驗(yàn),Morris水迷宮主要用于測試實(shí)驗(yàn)動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力,被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶,、老年癡呆,、海馬/外海馬研究、智力與衰老,、新藥開發(fā)/篩選/評價,、藥理學(xué)、毒理學(xué),、預(yù)防醫(yī)學(xué),、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的優(yōu)選經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)儀器
(Water maze test)
一. 實(shí)驗(yàn)原理
本實(shí)驗(yàn)由美國科學(xué)家Richard GM Morris 于1981年建立,。初用于研究腦內(nèi)結(jié)構(gòu)對學(xué)習(xí)和記憶的調(diào)節(jié)作用,,后來逐步發(fā)展成為目前較為常用的評價動物學(xué)習(xí)與記憶的模型。這一實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)是,,嚙齒類動物在水中有強(qiáng)烈的逃避水環(huán)境的動機(jī),,并以較快、直接的途徑逃離水環(huán)境,。學(xué)會逃避水環(huán)境的過程體現(xiàn)動物的學(xué)習(xí)能力,;根據(jù)周圍環(huán)境進(jìn)行空間定位,有目的地游往水中安全的地方(平臺),,體現(xiàn)動物的空間記憶能力,。
二.實(shí)驗(yàn)裝置
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)儀器由硬件和軟件兩部分組成:
硬件主要包括:Morris水迷宮水池(采用ABS工程塑料,大鼠直徑1.6米,,小鼠直徑1.2米,,高度均為50cm)、恒溫加熱系統(tǒng),、數(shù)顯溫控表,、方向標(biāo)識物、泛光窗簾,、手動升降站臺,、攝像系統(tǒng)、無線遙控升級站臺(選配),、槍式攝像機(jī)等
軟件:自主研發(fā)的SuperMaze軟件
三.實(shí)驗(yàn)方法
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)分獲得性訓(xùn)練,、探查和對位訓(xùn)練3個過程。
1. 獲得性訓(xùn)練理論上將水池分為4個象限,,平臺置于其中一個象限區(qū)的*,。
(1)將動物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,,放入位置隨機(jī)取東、西,、南,、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間(s),。在前幾次訓(xùn)練中,,如果這個時間超過60s,則引導(dǎo)動物到平臺,。讓動物在平臺上停留10s.
(2)將動物移開,、擦干。必要時將動物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,,放回籠內(nèi),。每只動物每天訓(xùn)練4次,兩次訓(xùn)練之間間隔15~20min,連續(xù)訓(xùn)練5d,。
2.探查訓(xùn)練:后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,,將平臺撤除,開始60s的探查訓(xùn)練,。將動物由原先平臺象限的對側(cè)放入水中,。記錄動物找到目標(biāo)象限(原先放置平臺的象限)所花的時間和進(jìn)入該象限的次數(shù),以此作為空間記憶的檢測指標(biāo),。
3.對位訓(xùn)練: 測定動物的工作記憶(working memory),。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開始維持4天的對位訓(xùn)練,。將平臺放在原先平臺所在象限的對側(cè)象限,,方法與獲得性訓(xùn)練相同,。每天訓(xùn)練4次,。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。
4.對位探查訓(xùn)練:后一次對位訓(xùn)練的第二天進(jìn)行,。方法與上述探查訓(xùn)練類似,。記錄動物60s內(nèi)動物在目標(biāo)象限(平臺第二次所在區(qū))所花時間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。
四.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
指標(biāo)類型 | 指標(biāo)參數(shù) |
通用指標(biāo) | 游泳距離,、運(yùn)動速度,、游泳時間 |
區(qū)域指標(biāo) | 各象限運(yùn)動路程、逗留時間,、*進(jìn)入時間,、進(jìn)入次數(shù) 長訪問時間、短訪問時間,、進(jìn)入前總路程,、*離開時間 |
特色指標(biāo) | 上站臺潛伏期,、搜索策略、接近站臺時間 與站臺大距離,、與站臺小距離 |
其他指標(biāo) | 軌跡圖 |
五.注意事項
1.對比食物驅(qū)動的模型(如放射臂迷宮),,水迷宮實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于,動物具有更大的,、逃離水環(huán)境的動機(jī),。而且不必禁食,特別適合老年動物的測試,。加上它對衰老引起的記憶減弱尤其敏感,,因此,水迷宮較常用于老年動物記憶的研究,。
2.如用小鼠,,除游泳池尺寸約為大鼠的50%以外,平臺直徑也較少(7.5cm),。實(shí)驗(yàn)方法與大鼠類似,,但訓(xùn)練周期較短。一般獲得性訓(xùn)練3天共訓(xùn)16次(*天4次,,后兩天每天6次,;兩次訓(xùn)練之間的間隔5~10min,第四天為探查訓(xùn)練,,第五,、六天為對位訓(xùn)練,每天訓(xùn)練六次,,第七天為第二次探查訓(xùn)練,。
3.如用肉眼觀察,在所有試驗(yàn)過程中試驗(yàn)著始終坐在同一位置,,距離泳池近的邊緣約60cm,。
4.每天在固定時間測試。操作輕柔,,避免不必要的應(yīng)激刺激,。
5.當(dāng)與其他同類實(shí)驗(yàn)相比較時,要注意到動物的性別,、品系,、泳池的尺寸和水溫等多種因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。此外,,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時,,要考慮到動物的體重、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對游泳速度可能造成影響,。
6.用老年動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,,應(yīng)確認(rèn)動物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作,。其方法如下:將平臺露出水面以使動物能夠看見平臺。動物放入泳池后如毫無困難地直接游向平臺,,說明動物的游泳能力和視力均正常,,可以開始實(shí)驗(yàn)。
7.游泳對動物是一個較大的應(yīng)激刺激,,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化,。這些變化可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。對老年動物,,嚴(yán)重時可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致卒中甚至死亡,。因此,必要時可將動物多次放入泳池或適當(dāng)延長其游泳時間以增加動物對游泳的適應(yīng)能力,。
8.當(dāng)用牛奶或奶粉攪渾泳池的水時,,要定期換水以免水變質(zhì)
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