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巴恩斯迷宮實驗儀器
一. 實驗原理
Barnes(巴恩斯)迷宮是美國學(xué)者Carol A Barnes1979年發(fā)明的用于檢測動物空間記憶的模型。與水迷宮和放射臂迷宮類似,,巴恩斯迷宮利用嚙齒類動物避光喜暗且愛探究的特性而建立的,。動物獲得的強化是從一個光亮、敞開的平臺上面逃往位于平臺下面的一個黑暗,、狹小的箱里,,該箱稱為目標(biāo)箱。經(jīng)過訓(xùn)練,,動物學(xué)習(xí)并記憶目標(biāo)箱的位置。該模型對動物的應(yīng)激性刺激較小,,既不像放射臂迷宮(八臂迷宮)那樣需要禁食,,也不像水迷宮那樣應(yīng)激性強。因此,,在記憶研究中較為常用,。尤其適用于與應(yīng)激相關(guān)的記憶研究以及基因敲除小鼠的行為表型研究。
二.實驗裝置
巴恩斯迷宮實驗儀器宮體采用無味的ABS塑料材質(zhì)或者醫(yī)用有機(jī)板制成的一個圓形平臺,,顏色為黑色或者灰色,,可旋轉(zhuǎn),直徑122cm。平臺周邊有18個或40個等距離圓洞,,分別用于大鼠和小鼠,,洞的直徑分別為10cm和5cm。其中一個洞(稱為目標(biāo)洞)與一暗箱(即目標(biāo)箱)相聯(lián),。其他圓洞則為空洞,,不與任何物體相聯(lián)。暗箱設(shè)置成抽屜式,,便于從中取出動物,。從平臺表面看不見目標(biāo)箱。迷宮抬高140cm,。動物通過目標(biāo)洞可逃至目標(biāo)箱內(nèi),。軟件采用我公司自主研發(fā)的SuperMaze軟件。
三.實驗方法
1.實驗開始前一天,,將動物單個從目標(biāo)洞置于目標(biāo)箱內(nèi)適應(yīng)4min,。
2.將動物置于迷宮*的塑料圓桶(直徑20cm,高27cm)內(nèi)限制活動5s,。
3.移開圓桶,,啟動計時器,實驗者在擋簾后進(jìn)行觀察,。動物四肢均進(jìn)入目標(biāo)箱,,則計為一次逃避(escape),并讓動物在箱內(nèi)停留30s。每一動物一次多觀察4min,。在此期間如果動物仍然找不到目標(biāo)箱,,則將動物從迷宮移開,放入目標(biāo)箱內(nèi)并停留30s,。利用這一間隙清潔迷宮,。動物每天訓(xùn)練兩次,連續(xù)5~6d,。
4.從第二次訓(xùn)練開始,,每次訓(xùn)練之前將迷宮隨機(jī)轉(zhuǎn)動一至數(shù)個洞的位置,但目標(biāo)箱始終固定在同一方位,。這樣做的目的是防止動物依靠氣味,、而非憑借記憶來確定目標(biāo)洞的位置。
實驗記錄以下參數(shù):探究任何一個洞的潛伏期,、到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期和每只動物的錯誤次數(shù)(一次錯誤定義為動物把頭伸向或探究任何一個非目標(biāo)洞,,包括專注于探究同一個非目標(biāo)洞)。
四.實驗數(shù)據(jù)
五.注意事項
1.動物記憶力減弱,,主要表現(xiàn)為動物成功獲得一次逃避之前的錯誤次數(shù)比對照組增多,,其次到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期延長,;探究任意洞的潛伏期可以延長,也可沒有明顯變化,。記憶力增強則表現(xiàn)相反,,即錯誤次數(shù)減少,到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期縮短,。
2.動物在迷宮遺留的氣味對下一只動物的迷宮操作影響很大,。因此,除在兩次訓(xùn)練之間旋轉(zhuǎn)迷宮外,,還要用70%酒精清潔迷宮,,以消除殘留氣味對下一只動物的導(dǎo)向作用。
3.巴恩斯迷宮平臺類似一個大敞箱(open field),,任何影響敞箱行為(自發(fā)活動)的因素(例如藥物處理或基因改變)均可影響實驗結(jié)果,。
4.品系差異 小鼠的愛探究特性使其成為巴恩斯迷宮研究的理想動物,但不同品系的小鼠在該實驗中的行為表現(xiàn)差別很大,。例如,,129S6小鼠在巴恩斯迷宮中很少有探究行為,因而很難找到目標(biāo)洞,。而C57BL/6J小鼠則有相當(dāng)多的探究行為,,適合于巴恩斯迷宮實驗。這一點在基因改變小鼠的記憶研究中尤其要注意,。
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