儀器介紹

熱板裝置由一塊金屬板,，微處理器控制的加熱裝置和帶蓋（有通氣孔）的透明圓柱形（直徑20 cm × 高度30cm）有機玻璃觀察室組成。顯示屏可以實時顯示金屬板的溫度,。圓柱形觀察室用于將實驗動物限制在金屬板上并防止其從設(shè)備上跳下,。建議選配攝像裝置用于輔助觀察和拍攝實驗用圖，也便于回溯分析,。

智能熱板儀,，型號：XR1700

實驗動物的選擇

疼痛的動物模型受到多種調(diào)節(jié)因素的重要影響，包括性別,、基因型和社會交流,，在使用動物模型時必須考慮所有這些因素。

在實驗動物的性別上,，熱板測試一定要選擇雌鼠,，因為雄鼠是有睪丸的,，實驗時陰囊的皮膚會不可避免地緊貼于金屬熱板，睪丸對熱的感受比爪子更敏感,，因此產(chǎn)生了混淆效應(yīng),。而且鼠會異常暴躁，影響實驗,。疼痛研究中最-常-用的動物是實驗室大鼠,，基本的熱板實驗可以選擇年輕的成年雌性Sprague Dawley大鼠。但是最近將這些疼痛模型應(yīng)用于具有靶向基因突變的小鼠已被證明是一種強大的工具,，然而,，大鼠和小鼠的行為反應(yīng)可能不同。正如Mogil等人簡潔地解釋的那樣,，“小鼠不是小的大鼠”,。如果首-次將已建立的大鼠模型應(yīng)用于小鼠，請務(wù)必牢記這一點,。

對于轉(zhuǎn)基因小鼠是否可以作為疼痛模型,，雖然充滿了解釋的復(fù)雜性，但是轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變了基本的疼痛研究,，即使在沒有選擇性配體或抗體的情況下，也可以研究單個蛋白質(zhì)在疼痛中的作用,。這項技術(shù)也意味著許多實驗室已經(jīng)從使用大鼠轉(zhuǎn)向使用小鼠了,。這種轉(zhuǎn)變并非沒有代價：在許多實際方面，小鼠作為疼痛實驗對象不如大鼠,。但廣泛使用轉(zhuǎn)基因小鼠的一個幸運結(jié)果是越來越關(guān)注遺傳背景對疼痛敏感性的影響,。

測試流程

1、實驗材料

1)最佳年齡的小鼠或大鼠（一般是6至8周）,。

2)測試藥物和溶劑對照,。

3)熱板裝置（可配備表面溫度計，用于校準(zhǔn)和維護(hù)設(shè)備）,。

2,、適應(yīng)

1)將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到實驗室，稱重并記錄,，讓動物適應(yīng)實驗室環(huán)境至少半小時,。

2)設(shè)置金屬板溫度與測試室的溫度匹配并清潔測試板表面。

3)將單個受試者動物放入測試小室中,，不受干擾地探索15分鐘,。

4)取出動物并清潔板表面的任何尿液或糞便。

3,、測試

1)將熱板溫度設(shè)置為測試溫度,，范圍通常在 50 °C～56 °C之間,。

2)一旦達(dá)到預(yù)設(shè)溫度，將適應(yīng)好的實驗動物放在熱板上,。

3)測量第一次出現(xiàn)傷害反應(yīng)（例如,，舔足，后爪抬起或跳躍）的潛伏期,。設(shè)置終止時間,，例如給藥后，動物沒有明顯的傷害感受反應(yīng),，則必須在提前規(guī)定的終止時間后將動物從熱板上移開,，以免對動物造成組織損傷。

4)出于倫理原因,，出現(xiàn)傷害反應(yīng)后應(yīng)快速將動物從測試表面上移開,，以避免不必要的痛苦和/或組織損傷。

5)將測試過的動物放入與未測試的動物分開的籠子中,。大/小鼠可以通過各種嗅覺和超聲波系統(tǒng)進(jìn)行交流,，這可能是焦慮和恐懼的來源。

6)將測試板溫度恢復(fù)到室溫,，并清潔金屬板的表面,。

4、測試多種溫度

如果在多個溫度下測試相同的小鼠,，則應(yīng)將測試分開至少24小時,，以避免壓力和重復(fù)測試對潛伏期時間的影響。

注意事項

1.可以預(yù)選30 s內(nèi)有疼痛反應(yīng)的動物進(jìn)行實驗,，將逃避,、跳躍等不安定的實驗動物剔除。

2.實驗前一定要讓動物適應(yīng)環(huán)境和裝置,，暴露于新環(huán)境可能會掩蓋或改變潛伏期數(shù)據(jù),。

3.每只動物測試結(jié)束后一定要清潔金屬板，因為后爪上的尿液或糞便可能會改變測試板的傳熱特性,，同時避免上一只動物的氣味對下一只測試動物的影響,。

4.傷害性反應(yīng)包括前爪縮回或舔舐，但不建議使用前爪的反應(yīng)作為觀察指標(biāo),，因為前爪通常參與梳理和探索行為,，并且與金屬表面的接觸不一致。后爪縮回或舔舐被認(rèn)為是傷害感受的更可靠指標(biāo),。不過,，簡單的后爪抬起也可能是由于梳理和探索。

5.不建議短時間內(nèi)重復(fù)測試,。在有害甚至無害的溫度下反復(fù)暴露于熱板測試可能降低行為反應(yīng)的潛伏期,。

在未加熱時對小鼠的“正常”行為進(jìn)行觀測是必要的,，以便可以注意到傷害性測試期間行為的任何差異。同樣重要的是要注意是否有任何其他因素可能影響疼痛行為,，例如梳理,、睡覺、排便或因噪音或光線水平的變化而分散注意力,。