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液相色譜儀使用及工作原理
閱讀：3016 發(fā)布時(shí)間：2022-8-25
工作原理：流動(dòng)相通過輸液泵流經(jīng)進(jìn)樣閥，與樣品溶液混合,，流經(jīng)色譜柱,，在色譜柱中進(jìn)行吸附、分離,，最后每一組分分別經(jīng)過檢測器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娪嵦?，在色譜工作站上出現(xiàn)相應(yīng)的樣品峰。
液相色譜的使用：首先對樣品進(jìn)行預(yù)處理,，然后進(jìn)樣,，進(jìn)樣完畢后，清洗進(jìn)樣口,，每次分析結(jié)束后,，清洗通道,，最后關(guān)閉儀器。
擴(kuò)展資料：液相色譜所用基本概念：保留值,、塔板數(shù),、塔板高度、分離度,、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,，但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動(dòng)相,，而液體和氣體的性質(zhì)不相同。
此外,，液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,，所以，液相色譜與氣相色譜有一定的差別,。
主要有以下幾力‘面：
?、俨僮鳁l件及應(yīng)用范圍不同
對于氣相色譜，是加溫操作,。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì),，對高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì),、熱不穩(wěn)定化合物,、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難,，致使其應(yīng)用受到一定程度的限制,，據(jù)統(tǒng)計(jì)只有大約20%的機(jī)物能用氣相色譜分析。
而液相色譜是常溫操作,，不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制,，它非常適合相對分子量較大，難汽化,，不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì),、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約占有機(jī)物的70%~80%,。
?、谝合嗌V能完成難度較高的分離工作
a.氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的，基本不參與分配平衡過程,，與樣品分子無親和作用,，樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動(dòng)相液體也與固定相爭奪樣品分子,，為提高選擇性增加了一個(gè)因素,。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動(dòng)相,，增加分離的選擇性。
b.液相色譜固定相類型多,，如離子交換色譜和排阻色譜等,，作為分析時(shí)，選擇余地大,；而氣相色譜并不可能,。
c.液相色譜通常在室溫下操作，較低的溫度,，一般有利于色譜分離條件的選擇,。
③由于液體的擴(kuò)散性比氣體的小105倍,，因此,，溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢，柱外效應(yīng)就顯得特別重要,；而在氣相色譜中,，由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。
?、芤合嗌V中,，制備樣品簡單，回收樣品也比較容易,，而且回收是定量的,，適合于大量制備，但液相色譜尚缺乏通用的檢測器,，一起比較復(fù)雜,，價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中,，這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的,。
綜上所述，液相色譜具有柱效高,，選擇性高,，靈敏性高，分析速度快,，重復(fù)性好,，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一,。目前在化學(xué),，化工，醫(yī)藥,，生化,，環(huán)保,，農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。
高效液相色譜應(yīng)用非常廣泛,，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。
(1)分離混合物：高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制,，流動(dòng)相可選擇的范圍寬,，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的,、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。
通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,，可分離并同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)，能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分,。并且隨著固定相的發(fā)展,，還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析：由于高效液相色譜法具有高分辨率,、高靈敏度,、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析,、醫(yī)藥研究,、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域,，并已成為解決生化分析問題有前途的方法,。
(3)儀器聯(lián)用：高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,，如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等：高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,，如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等．使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。