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產(chǎn)品簡介
詳細介紹
人用布病抗體檢測試劑盒(試管凝集法)
人用布病抗體檢測試劑盒(試管凝集法)說明說
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：人用布病抗體檢測試劑盒(試管凝集法)
【包裝規(guī)格】
12ml/瓶
【預(yù)期用途】
人用布病抗體檢測試劑盒(試管凝集法)
本品用于體外定性檢測人血清樣本中布魯氏菌抗體,，檢測結(jié)果僅用于科研學術(shù)參考，不能作為臨床診斷依據(jù),。布魯氏菌病是由布魯氏菌屬細菌引起的人畜共患的傳染病,。布魯氏菌具有很強的侵襲力和擴散力，當人與牲畜及其污染物接觸過程中,，可以經(jīng)過皮膚,、消化道、呼吸道黏膜等侵入人體,。布魯氏菌抗體的產(chǎn)生始于感染后的2-3周,。血液中產(chǎn)生的抗體可反映出感染的發(fā)生及發(fā)展過程，因此檢查血液中布魯氏菌抗體對了解布魯氏菌病的感染,、發(fā)病,、治愈等具有一定的意義。
布魯氏菌病試管凝集試驗（SAT）是比較穩(wěn)定,、特異且較敏感的1種血清學方法,，可以檢測人與動物血清中的抗布魯氏菌 IgG、IgM和 IgA三類免疫球蛋白抗體,，但主要檢測的是 IgM和 IgG型抗體,，且 SAT檢測IgM的敏感性顯著高于IgG，因此可作為人與動物感染布魯氏菌病的早期診斷,；同時也可用于布魯氏菌疫苗免疫后機體抗體水平的檢測,；若進行多次SAT，血清中凝集價不斷上升則診斷意義更大,。在實際應(yīng)用中SAT常用作布病普查的復(fù)檢與確證,。
【檢驗原理】
在37℃條件下，適宜濃度的菌體抗原可充分反應(yīng)結(jié)合血清樣本中布魯氏菌抗體,，反應(yīng)結(jié)束后,，根據(jù)其凝集程度可以判定血清樣本中布魯氏菌抗體滴度的高低。
【主要組成成分及性狀】
本品為乳白色液體,，長時間靜置后瓶底可見白色沉淀,，震搖后為均勻懸浮液。試劑的主要成分是經(jīng)加熱滅活的布魯氏菌牛型 104M株菌體，菌體懸于含 5g/L苯酚的生理鹽水中,。
【儲存條件及有效期】
于 2～ 8℃下保存，有效期24個月,。
試劑反復(fù)多次開瓶使用后,，6個月內(nèi)試劑性能不發(fā)生變化。
生產(chǎn)日期,、有效期至：見標簽,。
【 運 輸 條 件 】
2～ 30℃運輸（30℃不超過6天）。
【實驗器具】
1.試驗應(yīng)使用潔凈且透明度好的試管,。
2.試驗使用的吸管或移液器吸頭使用前應(yīng)*清洗,。
【樣本要求】
1.樣本的處理
應(yīng)采集空腹待檢者的血液不少于1mL，靜置或離心后采集血清,。
2.樣本的儲存
血清樣品若在一周內(nèi)進行檢測可儲存在 2～ 8℃條件下,；若超過一周之后檢測應(yīng)將樣本儲存于 -20℃條件下，同時應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3.已知的干擾物：
① 患者治療期間,，血清中藥物成分會造成部分血清樣本的凝集現(xiàn)象不明顯甚至出現(xiàn)假陰性，可選擇在療程間隔期進行復(fù)檢樣本的血清學檢驗,。
② 出現(xiàn)明顯溶血,、微生物污染的樣本不能用于檢測。
③ 在以下干擾物質(zhì)濃度條件下,，對布魯氏菌抗體檢測的結(jié)果影響較?。?總膽固醇≤ 10mmol/L ，類風濕因子≤ 300IU/mL ,，總膽紅素≤ 43umol/L,。
【檢驗方法】
1. 反應(yīng)于室溫（18～ 25℃）條件下進行，試驗前將試劑,、待檢樣本以及試管,、吸管等用具應(yīng)置于室溫下平衡 30分鐘以上。
2. 試劑使用前應(yīng)充分搖勻,。
3. 稀釋液：0.5%苯酚生理鹽水,。
4. 稀釋抗原液：布氏桿菌病試管凝集試驗抗原用稀釋液作1:10稀釋使用。
5. 準備五支試驗管（以做5個滴度為例）,，第1試管加入2.3ml生理鹽水,，其余試管加入0.5ml生理鹽水。
6. 取0.2ml待檢血清加入第1試管2.3ml生理鹽水內(nèi),，混勻后取0.5ml加入第二試管做1:1稀釋,，第二試管混勻后取0.5ml加入第三試管做1:1稀釋，以后各血清稀釋管以此類推，第1管內(nèi)應(yīng)棄去1.5ml剩余稀釋血清,，后一管棄去0.5ml剩余稀釋血清,，只留下0.5ml為試驗用。
7. 將稀釋抗原液0.5ml分別加入以上各試驗管,，各管內(nèi)待檢血清分別稀釋為1:25,1:50,1:100,1:200,1:400,。
8. 陰陽對照試驗管制備：將陰陽對照血清按要求體積稀釋后，操作步驟參照5.6.7,。
9. 比濁管制備：取稀釋抗原液1.25ml,，再加入等量的稀釋液作倍比(1:1)稀釋，制成稀釋抗原液A(1:20), 再按下表配制比濁管：
比濁管管號 | 稀釋抗原液A (ml) | 稀釋液(ml) | 清亮度 | 標記 |
1 | 0.00 | 1.00 | 100% | ++++ |
2 | 0.25 | 0.75 | 75% | +++ |
3 | 0.50 | 0.50 | 50% | ++ |
4 | 0.75 | 0.25 | 25% | + |
5 | 1.00 | 0.00 | 0% | - |
++++：*凝集,，上層液100％清亮,；+++：幾乎*凝集，上層液75％清亮,；++：顯著凝集,，液體50％清亮；+：有微量凝集,，液體25％清亮,；-：無凝集，液體不清亮,。 | ||||
++++：*凝集,，上層液100％清亮；+++：幾乎*凝集,，上層液75％清亮,；++：顯著凝集，液體50％清亮,；+：有微量凝集,，液體25％清亮；-：無凝集,，液體不清亮,。
10. 孵育：將試驗管，對照管及比濁管充分振蕩后置37℃±l℃溫箱中孵育20-22h,，取出室溫靜置2小時,，不需搖晃，以比濁管為標準判定結(jié)果,。
【檢測結(jié)果的解釋】
根據(jù)各反應(yīng)管內(nèi)上層液體的清亮度判定結(jié)果,。特別是50％清亮度(++)對判定結(jié)果關(guān)系較大，一定要與比濁管對比判定,。待檢血清效價在1:100(++)及以上者或病程一年以上滴度1∶50（++）及以上者為陽性,。以出現(xiàn)“++”及以上凝集現(xiàn)象的gao血清稀釋度判斷為該血清的抗體滴度.對于檢出的陽性病例在10天～ 14天后進行復(fù)檢有利于更準確進行布魯氏菌病的診斷,。
【診斷標準】： 布魯氏菌病診斷標準(WS268-2007)。
【產(chǎn)品性能指標】
抗原凝集效價不低于1:1000（++）,。
【檢驗方法的局限性】
1,、本試劑檢測用樣本為人血清，在樣品保存,、使用過程中,，應(yīng)注意因樣本可能存在潛在病原微生物（乙型肝炎、丙型肝炎,、梅毒及 HIV 病毒）等引起感染風險。
2,、該試驗作為單一的診斷方法是不完善的,，凝集反應(yīng)陽性時有診斷意義，由于有時會出現(xiàn)前帶及封閉現(xiàn)象即使凝集反應(yīng)陰性時也不能否定布魯氏菌病,，應(yīng)與虎紅平板凝集實驗（BPAT）,、平板凝集實驗（PAT）及抗人免疫球蛋白試驗(Coomb’s)等結(jié)合使用。
3,、該試驗操作較麻煩,、費時、費力,，不適合于用作大規(guī)模的篩選檢測,。另外該方法不能區(qū)分人工免疫和自然感染，并不是所有感染情形都出現(xiàn)具有診斷意義的抗體水平,，單獨使用SAT時易造成誤診和漏診,。
4、當被檢測血清樣本中布魯氏菌抗體含量超過1000IU/mL時,，試驗會出現(xiàn)不同程度的前帶現(xiàn)象,。
5、根據(jù)文獻報道及試驗結(jié)果,，布魯氏菌與腸炎耶爾辛氏O:9,、甲型副傷寒沙門氏菌、大腸桿菌O:157,、霍亂弧菌,、土拉熱弗朗西斯菌存在共同抗原，注意在檢測過程中可能出現(xiàn)的交叉反應(yīng),，應(yīng)對此予以鑒別,。
【注意事項】
1.嚴格按說明書進行操作，準確加樣并保證試驗的溫度條件,，低溫條件下反應(yīng)的靈敏度會降低,；按要求的時間及時觀察,，以免影響結(jié)果的判定。建議每次檢測時進行陽性及陰性對照實驗,，只有在對照實驗成立的前提下,，檢測結(jié)果才有意義。
2.試劑使用完后立即擰緊瓶蓋,，于 2～ 8℃下避光保存,，嚴禁凍存。
3.試劑使用前應(yīng)充分搖勻,；應(yīng)在有效期內(nèi)使用,，若瓶內(nèi)出現(xiàn)顆粒或搖振不散的凝塊時切勿使用,。
4.試劑含有苯酚及其它腐蝕性化學成份,，接觸或吞食對人體可造成危險！一旦接觸到皮膚應(yīng)立即用大量的水進行沖洗,，必要時需到醫(yī)院就診,。
5.試驗過程中按照實驗室規(guī)定采取必要的安全防護措施。
6.樣品,、洗滌液,、廢棄物和試驗用具都視同有傳染性的物品，請遵循國家和地方的相應(yīng)法規(guī)和要求,，采用安全和可接受的方法對所有材料進行處理,。
7.本品作為科研試劑，檢測結(jié)果僅用于科研學術(shù)交流,，不能作為臨床診斷依據(jù),。