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豬圓環(huán)病毒（2型）抗體檢測試劑盒

需自備的設(shè)備及試劑

微量移液器： 0.5μl～10μl、10μl～100μl、100μl～1000μl,。 一次性移液器吸頭,。 量筒：500ml。 96孔板酶標(biāo)儀,。 蒸餾水或去離子水,。 洗瓶或洗板機(jī)。

樣品制備

取動物全血,，按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮，無溶血,。

洗滌液的準(zhǔn)備

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫,，如有鹽結(jié)晶，搖動使結(jié)晶的鹽溶解,，然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋,。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右豬圓環(huán)病毒（2型）抗體檢測試劑盒

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樣品的稀釋

在血清稀釋板中按1：101的體積比稀釋待檢血清（例如：200μl樣品稀釋液中加2μl待檢血清）,。

注意：陰性和陽性對照不用稀釋,。取每個樣品后都要更換吸頭，準(zhǔn)確記錄每個樣品在板上的位置,。每個樣品在加入到包被板微孔前應(yīng)充分混勻,。

操作步驟

豬圓環(huán)病毒（2型）抗體檢測試劑盒取預(yù)包被的檢測板（根據(jù)樣品*，可拆開分次使用）,，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中,。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,，取陰性及陽性對照各100μl

分別加入反應(yīng)孔中,，空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）,。

蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,，甩掉板孔中的溶液,，用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl）,，靜置1分鐘后甩掉,。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。 每孔加酶結(jié)合物100μl,，蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘,。 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液,，洗滌3次, 方法同2,。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl,、再加底物B液50μl,，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘,。 每孔加終止液50μl,，使反應(yīng)終止，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果,。

結(jié)果判定

以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值,。試驗(yàn)成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.4，陰性對照孔A450值必須小于0.1,。如果試驗(yàn)無效,，試驗(yàn)中的操作值得懷疑，試驗(yàn)應(yīng)重做,，并仔細(xì)檢察各組分,。

樣品A450值大于0.25+陰性對照孔均值,，判為陽性,；樣品A450值小于0.25+陰性對照孔均值，判為陰性,；如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計(jì)算,。

有效期

貯存方法： 2 - 8oC下貯存。

有效期： 12個月,。